Reação de acessos e cultivares de meloeiro a Pseudoperonospora cubensis e identificação de Quantitative Trait Loci de resistência do meloeiro ao míldio

• Main Author: Albuquerque, Leidiane Bezerra
• Other Authors: Antonio, Rafaela Priscila
• Format: Others
• Language: Portuguese
• Published: Universidade Federal Rural do Semi-Árido 2016
• Subjects: Cucumis melo L.; Germoplasma; Marcadores de DNA; Resistência genética; Germplasm; DNA markers; Resistance gene; CNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::AGRONOMIA::FITOTECNIA
• Online Access: http://bdtd.ufersa.edu.br:80/tede/handle/tede/231

Made available in DSpace on 2016-08-12T19:18:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 leidianeBA_DISSERT.pdf: 951596 bytes, checksum: 769c70c85ea3d6f0353cabbe1093e973 (MD5) Previous issue date: 2014-02-28 === Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior === Downy mildew, caused by the fungus Pseudoperonospora cubensis, is a major threat to the production of melons in wetlands worldwide. Despite its importance, there are few studies involving the assessment of sources of resistance, as well as the identification of molecular markers that are connected to this feature and that may help breeders in marker-assisted selection (MAS). Given this, the objectives of this work were promote the selection of sources of resistance to downy mildew, from melon accessions, collected from different states in the Northeast region of Brazil and to identify QTLs that co-segregate with the resistance gene of this pathogen, using the F2:3 obtained from parents and Védrantais MR-1, contrasting to the register character. To identify sources of resistance, thirty-six accesses and four commercial cultivars in a randomized block design (RBD) were assessed with three replications and seven plants per plot, which evaluation was made on the field. The evaluation was carried out on 24 days after transplanting the seedlings to the field, when 50% of plants reached the stage of flowering, with the aid of a diagrammatic scale. It was observed that there is variability in melon germplasm for reaction to downy mildew. The accessions A1, A4, A6, A9, A12, A17, A18, A23, A27, A35 and A36 were considered promising for use in breeding programs aiming resistance to P cubensis. All commercial cultivars analyzed were highly susceptible to the pathogen. To identify markers connected the resistance QTLs, MR-1 and Védrantais parents were crossed and subsequently the F2 generation was obtained. It was extracted the DNA for evaluation molecular of the 98 plants obtained with microsatellite primers polymorphic selected from contrasting parents. Of F2 plants were obtained 98 progenies F2:3 that were used for the assessments phenotypic of the severity caused by P. cubensis, it was used the same time assessment described in the previous experiment, the period April-June 2013. The experimental design utilized was lattice simple 10 x 10. The efficiency of lattice was low (100.28%) thus data were analyzed in DBC. Significant genetic differences (P<0.01) between the progenies were identified. The estimated of heritability was considered high (86.75%), indicating successful selection. Were found 23 primers polymorphic, of this sum, thirteen amplified in all the population and were used for analyzes genotypic. Of these, ten markers presented values below level critical specified by FDR test. There was more proportion allele of parent Védrantais for eight loci, while there was more proportion allele the parent MR-1 for two loci. For other loci (three), frequencies allelic did not change. The values coefficients of determination (R2) obtained for the markers were relatively low in population. By regression simple linear, the markers explained the feature in population F2:3 the most were CMBR 139 and CMMS 22-2, being the same identified by regression multiple linear, thus they can also be used in SAM === O míldio, causado pelo fungo Pseudoperonospora cubensis, é uma das principais ameaças à produção do meloeiro em áreas úmidas em todo o mundo. Apesar de sua importância, são poucos os trabalhos envolvendo a avaliação de fontes de resistência, bem como a identificação de marcadores moleculares que estejam ligados a esta característica e que possam auxiliar os melhoristas na seleção assistida por marcadores (SAM). Diante disso, os objetivos deste trabalho foram promover a seleção de fontes de resistência ao míldio, a partir de acessos de meloeiro, coletados em diferentes estados da região Nordeste do Brasil e também identificar QTLs que co-segreguem com genes de resistência a este patógeno, utilizando progênies F2:3 obtidas dos genitores MR-1 e Védrantais, contrastantes para o caráter. Para a identificação de fontes de resistência, foram avaliados trinta e seis acessos e quatro cultivares comerciais em delineamento em blocos casualizados (DBC) com três repetições e sete plantas por parcela, cuja avaliação foi feita em campo. A avaliação se deu aos 24 dias após o transplantio das mudas para o campo, depois que 50% das plantas atingiram o estágio de floração, com o auxílio de uma escala diagramática. Observou-se que existe variabilidade no germoplasma de meloeiro para reação ao míldio. Os acessos A1, A4, A6, A9, A12, A17, A18, A23, A27, A35 e A36 foram considerados promissores para o uso em programas de melhoramento visando resistência a P cubensis. Todas as cultivares comerciais analisadas foram altamente suscetíveis ao patógeno. Para identificação de marcadores ligados a QTLs de resistência, os genitores MR-1 e Védrantais foram cruzados e posteriormente foi obtida a geração F2. Das 98 plantas obtidas foi extraído o DNA para avaliação molecular com primers microssatélites polimórficos selecionados a partir dos genitores contrastantes. Das plantas F2 foram obtidas 98 progênies F2:3 que foram utilizadas para as avaliações fenotípicas quanto a severidade provocada por P. cubensis, seguindo a mesma época de avaliação descrita no experimento anterior no período de abril a junho de 2013. O delineamento utilizado foi o látice simples 10 x 10. A eficiência do látice foi baixa (100,28%), por isso, os dados foram analisados em DBC. Foram identificadas diferenças genéticas significativas (P<0,01) entre as progênies. A estimativa de herdabilidade foi considerada alta (86,75%), indicando sucesso com a seleção. Foram encontrados 23 primers polimórficos. Treze amplificaram em toda a população e foram utilizados para as análises genotípicas. Destes, dez marcadores apresentaram valores abaixo do nível crítico especificado pelo teste FDR. Para oito locos houve maior proporção de alelos do genitor Védrantais, enquanto que para dois locos houve maior proporção de alelos do genitor MR-1. Para os demais locos (três), as frequências alélicas não se alteraram. Os valores dos coeficientes de determinação (R2) obtidos para os marcadores foram relativamente baixos na população. Pela regressão linear simples, os marcadores que mais explicaram a característica na população F2:3 foram CMBR 139 e CMMS 22-2, sendo os mesmos identificados pela regressão linear múltipla, podendo, portanto, serem utilizados na SAM