<b>Purificação de lacases PPO-I de <em>Botryosphaeria rhodina</em></b> - DOI: 10.4025/actascibiolsci.v27i3.1317

• Published in: Acta Scientiarum: Biological Sciences
• Main Authors: Francis Widmann Hiroito Obara, Geni Varea Pereira, Dalva Tomoe Miyagui, Maria de Lourdes Corradi da Silva
• Format: Article
• Language: English
• Published: Universidade Estadual de Maringá 2008-03-01
• Subjects: lacase; glicoproteína; exopolissacarídeo; purificação; Botryosphaeria rhodina
• Online Access: https://www.periodicos.uem.br/ojs/index.php/ActaSciBiolSci/article/view/1317
• ISSN: 1679-9283; 1807-863X

Lacases são glicoproteínas polifenol oxidases envolvidas na patogenicidade de alguns fungos e úteis em processos biotecnológicos. O ascomiceto ligninolítico Botryosphaeria rhodina tem sido estudado como produtor de exopolissacarídeos e de lacases PPO-I e PPO-II induzidas pelo álcool veratrílico. Como as lacases produzidas ainda não foram isoladas, o objetivo deste trabalho foi purificar lacases PPO-I e identificar os carboidratos constituintes da porção glicosídica. O fungo foi cultivado em meio mínimo de Vogel contendo 1% de glicose e 30,4 mM de álcool veratrílico, a 28C e agitação de 180 rpm durante 4,5 dias. O extrato livre de células apresentou elevada concentração de carboidratos e de PPO-I estáveis a 4ºC e -18ºC durante 40 dias. Técnicas de ultrafiltração, cromatografia em gel Sephadex G-100 e em resina DEAE-Celulose purificaram lacases PPO-I com peso molecular de 113 kDa por eletroforese PAGE-SDS, contendo 40% de proteínas e 60% carboidratos identificados por HPAEC-PAD como fucose, galactose, manose, glucose e glucosamina