Expresión heteróloga de un péptido multiepitópico de células B de M. tuberculosis en Saccharomyces cerevisiae
Saccharomyces cerevisiae ha sido ampliamente utilizada como sistema de expresión de proteínas heterólogas. El presente trabajo se encaminó hacia la expresión en Saccharomyces cerevisiae de un péptido de epitopes múltiples de M. tuberculosis. Con dicho propósito el péptido quimérico denominado B2 fue...
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Finlay Ediciones
2007-08-01
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doaj-113534be2d4c49ed97eacaf68a1bb0072020-11-24T23:39:30ZengFinlay EdicionesVacciMonitor1025-028X1025-02982007-08-011622125Expresión heteróloga de un péptido multiepitópico de células B de M. tuberculosis en Saccharomyces cerevisiaeMaría de los Angeles García 0María Elena Sarmiento1Roberto Coria2Laura Kawasaky3Laura Ongay4Juan Francisco de la Rosa5Armando Acosta6Instituto Finlay. Centro de Investigación-Producción de Vacunas y Sueros. La Habana,CubaInstituto Finlay. Centro de Investigación-Producción de Vacunas y Sueros. La Habana,CubaInstituto de Fisiología Celular, UNAM, D.F. MéxicoInstituto de Fisiología Celular, UNAM, D.F. MéxicoInstituto de Fisiología Celular, UNAM, D.F. MéxicoGrupo Empresarial LABIOFAM. Ave. Independencia Km 16½. Boyeros. Ciudad de La Habana. Cuba.Instituto Finlay. Centro de Investigación-Producción de Vacunas y Sueros. La Habana,CubaSaccharomyces cerevisiae ha sido ampliamente utilizada como sistema de expresión de proteínas heterólogas. El presente trabajo se encaminó hacia la expresión en Saccharomyces cerevisiae de un péptido de epitopes múltiples de M. tuberculosis. Con dicho propósito el péptido quimérico denominado B2 fue clonado en dos vectores de expresión de esta levadura con promotores regulables por galactosa y sulfato cúprico, respectivamente. Luego de los experimentos de inducción, la expresión del péptido B2 fue analizada mediante SDS/PAGE y Western blot. El análisis por Western blot confirmó la expresión del péptido B2, al hacerse la inducción con 100 mM de CuSO4 durante toda la noche. No ocurrió así en los experimentos donde se utilizó la galactosa como inductor con todas las condiciones ensayadas. Estos resultados muestran que la levadura Saccharomyces cerevisiae pudiera ser un buen hospedero alternativo para la expresión de péptidos multiepitópicos de M. tuberculosis.http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1025-028X2007000200004&lng=es&nrm=iso&tlng=esSaccharomyces cerevisiaetuberculosisvacunaexpresiónantígeno |
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Saccharomyces cerevisiae ha sido ampliamente utilizada como sistema de expresión de proteínas heterólogas. El presente trabajo se encaminó hacia la expresión en Saccharomyces cerevisiae de un péptido de epitopes múltiples de M. tuberculosis. Con dicho propósito el péptido quimérico denominado B2 fue clonado en dos vectores de expresión de esta levadura con promotores regulables por galactosa y sulfato cúprico, respectivamente. Luego de los experimentos de inducción, la expresión del péptido B2 fue analizada mediante SDS/PAGE y Western blot. El análisis por Western blot confirmó la expresión del péptido B2, al hacerse la inducción con 100 mM de CuSO4 durante toda la noche. No ocurrió así en los experimentos donde se utilizó la galactosa como inductor con todas las condiciones ensayadas. Estos resultados muestran que la levadura Saccharomyces cerevisiae pudiera ser un buen hospedero alternativo para la expresión de péptidos multiepitópicos de M. tuberculosis. |
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