Identidad de la vacuna contra Streptococcus pneumoniae “Quimi-Vio” mediante la técnica Dot Blot empleando los anticuerpos monoclonales contra los polisacáridos capsulares 1,5, 6B, 14 y 19F de la bacteria

• Main Authors: Elizabeth González Aznar, Rubén Adonis Cabrera Arias, Fidel Ramírez Bencomo
• Format: Article
• Language: English
• Published: Universidad Católica de Oriente 2017-02-01
• Series: Bionatura
• Subjects: Ensayo de Identidad; Dot Blot; Vacunas antineumocócicas
• Online Access: http://revistabionatura.com/2017.02.01.7.html

Streptococcus pneumoniae (neumococo) constituye una de las principales causas de enfermedades infecciosas bacterianas, particularmente en niños menores de 2 años de edad. Basadas en el polisacárido capsular (PsC), su principal factor de virulencia, existen dos tipos de vacunas aprobadas para uso en humanos: las vacunas polisacarídicas planas y las vacunas polisacarídicas conjugadas. Quimi-Vio, la vacuna antineumocócica cubana, pertenece al segundo grupo y está compuesta por los PsC de los siete serotipos de mayor incidencia y circulación en Cuba (1, 5, 6B, 14, 18C, 19F y 23F). El objetivo de este trabajo fue realizar el ensayo de identidad de la vacuna cubana Quimi-Vio empleando los AcM contra los PsC 1, 5, 6B, 14, y 19F de Sp obtenidos recientemente en el Instituto Finlay de Vacunas, teniendo en cuenta que los Ensayos de identidad de las vacunas son requisito indispensable para la liberación final de los lotes. La técnica empleada para la realización del ensayo de identidad de Quimi-Vio fue el Dot Blot, donde empleando membrana de Nitrocelulosa se realizó la captura de tres lotes de vacuna Quimi-Vio y como control positivo de la técnica los respectivos PsC de los serotipos 1, 5, 6B, 14, y 19F sin conjugar y una vacuna comercial Prevenar-13. Para la identidad de los PsC de neumococo se emplearon los respectivos AcM a una concentración de 10µg/mL y como segundo anticuerpo anti IgG de ratón conjugado a peroxidasa teniendo en cuenta que los AcMs empleados son murinos. Cada AcM fue capaz de identificar de forma altamente especifica al PsC homologo (mismo serotipo), tanto en su forma no conjugada y monovalente como en el contexto de las vacunas Quimi-Vio y Prevenar 13V, donde además de estar conjugado al TT se encuentra mezclado con otros PsC de forma multivalente. La técnica Dot Blot empleando los AcMs contra los PsC serotipos 1, 5,6B, 14 y 19F permite identificar de forma específica cada PsC en la formulación multivalente, por lo que puede ser utilizada para el ensayo de identidad de la vacuna Quimi-Vio, garantizando así la liberación de lotes y control de la calidad de la misma.