Methodology for sporulation and production of monoconidial isolates of Sphaeropsis sapinea Metodologia para esporulação e produção de culturas monospóricas de Sphaeropsis sapinea

• Main Authors: Paula Rachel Rabelo Corrêa Basilio, Celso Garcia Auer, Álvaro Figueredo dos Santos, Antonio Rioyei Higa
• Format: Article
• Language: English
• Published: Embrapa Florestas 2010-06-01
• Series: Pesquisa Florestal Brasileira
• Subjects: Inóculo, patógeno, pínus.
• Online Access: http://www.cnpf.embrapa.br/pfb/index.php/pfb/article/view/139
• ISSN: 1809-3647; 1983-2605

Sphaeropsis sapinea is one of main pathogens that causes losses in commercial plantations of Pinus&lt;br /&gt;spp. Studies for control based on genetic resistance can be done by inoculating different monosporic isolates on&lt;br /&gt;pine populations and selectioning the resistant individuals. This work describes a methodology for pycnidia production in vitro and S. sapinea monoconidial cultures, using an agar-water medium with sterile pine needles. Four S. sapinea isolates were tested e pycnidia and mature conidia were observed after 14 days of incubation, under continuous fluorescent light, in BOD, at 25 °C. Pycnidia were triturated in sterile water and conidia germinated after two hours of incubation in water-agar, in BOD, at 25 °C. Germinated conidia formed colonies which were purified in malt extract-agar and maintained in test tubes with the same medium, covered with sterile mineral oil for preservation. This methodology revealed to be  adequated for production of monoconidial colonies&lt;br /&gt;of S. sapinea<br>Sphaeropsis sapinea é um dos principais patógenos causadores de perdas em plantios comerciais de Pinus spp. Estudos de controle por resistência genética podem ser feitos pela inoculação de vários isolados monospóricos em populações de pínus e selecionando-se os indivíduos resistentes. Este trabalho descreve uma metodologia de produção de picnídios in vitro e culturas monospóricas de S. sapinea, usando um meio ágarágua (AA) com fragmentos de acículas de Pinus taeda esterilizadas. Quatro isolados de S. sapinea foram testados e os picnídios e conídios maduros foram observados após 14 dias de incubação, sob luz fria em BOD, a 25 °C. Os picnídios foram triturados em água e os conídios germinaram após duas horas de incubação em meio AA, em BOD, a 25 ºC. Os conídios germinados formaram  colônias que foram purificadas em meio extrato de malteágar e mantidas em tubos de ensaio com o mesmo meio e imersas em óleo mineral estéril para preservação. A metodologia revelou ser adequada para a produção de colônias monospóricas do fungo S. sapinea.