Evaluación de proteínas relacionadas con la diferenciación de células madre hematopoyéticas CD34+ obtenidas de sangre de cordón umbilical
La sangre de cordón umbilical es una alternativa para el aislamiento y cultivo de células madre hematopoyéticas CD34+, útiles en terapias de reemplazo medular en el tratamiento de patologías neoplásicas y no neoplásicas. En este trabajo se evalúa la expresión de proteínas relacionadas con la diferen...
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doaj-81cf70f07cf04bf6a918de3ec38ae70e2020-11-25T01:06:42ZspaEditorial Ciencias MédicasRevista Cubana de Hematología, Inmunología y Hemoterapia1561-2996242S0864-02892008000200005Evaluación de proteínas relacionadas con la diferenciación de células madre hematopoyéticas CD34+ obtenidas de sangre de cordón umbilicalIvonne Flechas0Claudia Mera1Lina Vargas2Viviana Marcela Rodríguez Pardo3Pontificia Universidad JaverianaUniversidad de Los AndesPontificia Universidad JaverianaPontificia Universidad JaverianaLa sangre de cordón umbilical es una alternativa para el aislamiento y cultivo de células madre hematopoyéticas CD34+, útiles en terapias de reemplazo medular en el tratamiento de patologías neoplásicas y no neoplásicas. En este trabajo se evalúa la expresión de proteínas relacionadas con la diferenciación de células madre hematopoyéticas CD34+ en cultivo. Las muestras de sangre de cordón fueron recolectadas en bolsas con CPDA (Baxter®) y transportadas al Laboratorio de Hematología de la Facultad de Ciencias de la Pontificia Universidad Javeriana. El aislamiento de la células madre hematopoyéticas CD34+ se realizó mediante el uso del sistema Miltenyi biotec Microbeads® a partir de células mononucleares obtenidas por gradiente de densidad con Ficoll-Hypaque Amershan Biosciences®. Las células CD34+ se cultivaban en medio Stem Pro® suplementado con IL3, SCF y GM-CSF entre 5 y 11 días a 37 ºC y 5 % CO2. Se determinó la viabilidad celular, cambios morfológicos por microscopia invertida y la expresión de las proteínas CD34, CD33 y CD38, así como Bcl-2 y CD95 por medio de citometría de flujo. Se establecieron 6 (n=6) cultivos enriquecidos con células hematopoyéticas CD34+, con un promedio de viabilidad del 84,25 % y tiempo de cultivo entre 5 y 11 días. En la evaluación morfológica se observó la aparición de prolongaciones citoplasmáticas o seudópodos tipo magnupodia hasta el día 7 de cultivo. Se observó la co-expresión de los anfígenos CD34 y CD33, con un aumento a partir del día 7 de la proteína CD95. Las células madre hematopoyéticas CD34+ obtenidas de sangre de cordón umbilical presentan prolongaciones citoplasmáticas posiblemente relacionadas con interacciones célula a célula. En nuestro sistema de cultivo, las células madre hematopoyéticas obtenidas inician procesos de diferenciación mieloide que se relacionan indirectamente con la expresión de Bcl-2 y CD95.http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0864-02892008000200005&lng=en&tlng=encélulas madre hematopoyéticascitometría de flujocordón umbilicalcultivo celularmedula ósea |
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