Deteccion de amastigotas en Leishmaniasis cutanea y mucocutanea por el metodo de inmunoperoxidasa, usando anticuerpo policlonal: sensibilidad y especificidad comparadas con metodos convencionales de diagnostico Detection of amastigotes in cuteneous and mucocutaneous leishmaniasis by the immunoperoxidase method, using polyclonal antibody sensibility and specifity compared with conventional diagnosis methods

• Main Authors: Graciela Salinas, Liliana Valderrama, Gloria Palma, Guilhermo Montes, Nancy Saravia
• Format: Article
• Language: English
• Published: Instituto Oswaldo Cruz, Ministério da Saúde 1989-03-01
• Series: Memórias do Instituto Oswaldo Cruz.
• Subjects: inmunoperoxidasa; histopalaogia; leishmaniasis tegumentaria; Leishmania braziliensis; amastigotas; inmunohistoquímica; immunoperoxidase; histopathology; tegumentary leishmaniasis; amastigotes; immunohistochemistry
• Online Access: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0074-02761989000100010

Con el objeto de aumentar la sensibilidad del diagnóstico histopatológico de lesiones cutáneas y mucocutáneas causada por subespecies del complejo Leismania braziliensis y para lograr una mejor visualización de los parásitos en las lesiones, se evaluó el método de la inmunoperoxidas indirecta para localizar en forma rápida y específica los amastigotas en biopsia de tejido afectado. Los cortes de tejido se fijaron en formol y se incluyeron en parafina; después se evaluaron por inmunohistoquímica usando un antisuero policlonal producido en conejo, como reactivo primario, Se examinaron 265 biopsias de pacientes con lesiones sospechosas de leishmaniasis de la costa Pacífica y región suroriental colombiana. a 1983 (72.8%) pacientes se les estableció el diagnóstico por métodos clínicos y/o poarasitológicos. Los resultados obtenidos por la inmunoperoxidasa en el grupo de pacientes a los cuales se les confirmó la leishmaniasis se compararn con la histopatología convencional, el examen directo de frotis y el aislamiento del parásito por cultivo del aspirado de la lesión. La localización inmunoenzimática de las amastigotas fue más efectivas (61.3%) que la histopatología com hematoxilina y eosina (34.6%), y que el frotis (43,9%). En cambio, el cultivo de aspirado fue más sensible (89.8%). La eficiencia del método de inmunoperoxidasa fue mayor en las lesiones recientes (72.5%) positivos en los casos con menos de tres meses de evolución) que en las lesiones más antiguas (55.6, 37.5 y 21.1% para 3-5.9, 6-11 meses y mayores o iguales a 12 mese, respectivamente). La combinación de frotis e inmunoperoxidasa incrementó el porcentaje de caso diagnosticados a 72.0%, lo que indica la importancia de combinar métodos para obtener una mayor eficiencia de diagnóstico. La especificidad fue de 100% en controles sanos y 92.9% en pacientes con lesiones causadas por agentes etiológicos distintos a leishmania.<br>The indirect immunoperoxidase method was evaluated in 265 biopsies with the purpose of increasing the sensitivity of the diagnostic histopathology of tegumentary lesions caused by subspecies of the Leishmania braziliensis complex. A diagnosis of leishmaniasis was established by parasitological methods (181) or clinical criteria (12) in 193 patients (72.8%). In the latter group of confirmed cases standard histochemstry and immunoperoxidase were compared with direct examination of tissue scraping and culture of lesion aspirates. The detection and localization of amastigotes was more efficient using the immunoperoxidase method (61.3%) than conventional histopathology with hematoxilin and eosin (34.6%) or direct examination of tissue scraping (43.9%). Howerver, culture of lesion aspirates was the most sensitive procedure (89.8%). The efficiency of the immunoperoxidase method was greater in recent lesions, being positive in 75% of cases with less than 3 months evolution, while 55.6%, 37.5% and 21.1% of cases with lesion evolution of 3-5.9, 6-11, and 12 months or greater, respectively, were positive. The combined use of the direct examination of lesion scraping and immunoperoxidase applied to histological sections of the biopsy from the lesion border allowed an etiologic diagnosis of 72% of confirmed cases. Cross-reactivity was observed with Paracoccidioides braziliensis but not with Mycobacterium leprae, Sporothrix schenckii, or Histoplasma capsulatum.