Sinefrina: Desenvolvimento e Validação de Método Indicativo da Estabilidade e Avaliação da Toxicidade em Extrato Seco de Citrus Aurantium L.

• Main Author: Kaefer, Cristina Lenhardt
• Other Authors: Malesuik, Marcelo Donadel
• Language: Portuguese
• Published: Universidade Federal do Pampa 2015
• Subjects: Citrus aurantium; Sinefrina; Degradação; Validação; Estabilidade; Toxicidade; Synephrine; Degradation; Validation; Stability; Toxicity
• Online Access: http://dspace.unipampa.edu.br:8080/xmlui/handle/riu/233

Submitted by Sandro Camargo ([e-mail]) on 2015-05-08T02:31:25Z No. of bitstreams: 1 127110043.pdf: 1117718 bytes, checksum: d6d7a14f6753e1dcd024e07172767a54 (MD5) === Made available in DSpace on 2015-05-08T02:31:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 127110043.pdf: 1117718 bytes, checksum: d6d7a14f6753e1dcd024e07172767a54 (MD5) Previous issue date: 2014-07-21 === A incidência de sobrepeso e obesidade na população em geral vem revelando-se um grave problema de saúde pública. Este fato, aliado aos parâmetros atuais de beleza, que prezam pela magreza, geram uma busca desenfreada por formulações “naturais” que contenham substâncias ditas emagrecedoras. Nesse sentido, o Citrus aurantium, conhecido popularmente como laranja amarga, está sendo amplamente utilizado. No entanto, até o momento não existem métodos indicativos da estabilidade para o controle de qualidade desses produtos e estudos da estabilidade do seu marcador, a sinefrina. Portanto, o presente trabalho tem como objetivo desenvolver e validar método indicativo da estabilidade, realizar estudo preliminar da estabilidade e verificar a toxicidade da sinefrina na presença dos produtos de degradação formados em condições fotolíticas. O método indicativo de estabilidade foi desenvolvido por CLAE-DAD para determinação de sinefrina em extrato seco de Citrus aurantium. A separação cromatográfica utilizou coluna C18 (250 x 4,6 mm, 5μm), fase móvel composta por acetonitrila : ácido ortofosfórico 0,01% (pH 3,0) na proporção 15:85, vazão de 1 mL min -1 e detecção em 220 nm. A resposta do detector foi linear, na faixa de 7,5 a 45 μg mL -1 . A especificidade do método e a capacidade indicativa de estabilidade foram confirmadas utilizando degradação forçada, em condições ácidas, básicas, oxidativas e fotolíticas. Tanto a sinefrina como o extrato demonstraram ser susceptível a degradação em todas as condições testadas. A precisão intradia demonstrou valores de DPR menores que 1,77% e a precisão interdia DPR de 2,48%. A recuperação média, no teste de exatidão, foi de 102,03%. A cinética de fotodegradação foi calculada, para ambas as amostras, sinefrina e extrato, através da concentração do fármaco em função do tempo. A degradação da sinefrina SQR dissolvida em acetonitrila seguiu cinética de segunda ordem, enquanto que o extrato de Citrus aurantium demonstrou cinética de primeira ordem. O estudo toxicológico da sinefrina na presença dos produtos de degradação formados foi realizado. Os resultados indicam que as amostras não apresentaram efeito mutagênico, mas causaram dano ao DNA e diminuição da viabilidade celular. Os dados obtidos colaboram com os estudos na área e podem ser utilizados como subsídios para elaboração de preparações farmacêuticas ou suplementos alimentares a base dessa substância. === The incidence of overweight and obesity in the general population is proving to be a serious public health problem. This fact, coupled with existing parameters of beauty, which consider the thinness, generate an unbridled pursuit for "natural" formulations which contains substances called slimming. In this sense, Citrus aurantium, popularly known as bitter orange, it is being widely used. However, so far there are no methods for quality control of these products and stability studies of its marker, synephrine. Therefore, this study aims to develop and validate the stability indicating method, perform a stability preliminary study and the toxicity of synephrine and photolytic degradation products formed. Stability indicating method was developed by HPLC - PDA for determination of synephrine in Citrus aurantium dry extract. The chromatographic separation used C18 (250 x 4.6 mm, 5μm) column and a mobile phase consisting of acetonitrile: 0.01% orthophosphoric acid (pH 3.0) in the ratio 15:85, flow rate 1 mL min -1 and detection at 220 nm. The detector response was linear in the range 7.5-45 mg mL -1 . The specificity and stability indicating capability were confirmed using forced degradation under conditions of acidic, basic, oxidative and photolytic. Both the extract and synephrine shown to be susceptible to degradation in all conditions tested. Intraday precision shown RSD values lower than 1.77% and interday precision of 2.48% RSD. The average recovery accuracy of the test was 102.03%. The photodegradation kinetics was calculated for both samples, through the concentration of the drug in function of time. The degradation of synephrine SQR diluted in acetonitrile followed second-order kinetics, while the extract of Citrus aurantium showed first-order kinetics. The toxicological study of synephrine in the presence of degradation products formed was performed. The results indicate that the samples showed no mutagenic effect, but its highest concentration showed DNA damage and decreased the cell viability. Data obtained collaborate with studies in the area and can be used as input for the preparation of pharmaceutical preparations or dietary supplements that the base substance.