| Summary: | Mais estudos sobre ações neuromoduladoras das angiotensinas no Sistema Renina
Angiotensina (SRA) poderiam melhorar a compreensão de muitas funções e
distúrbios do sistema nervoso central. A via de sinalização de
PTEN/PI3K/AKT/mTOR que pode ser ativada pela Angiotensina-(1-7) desempenha
um papel essencial na regulação do crescimento, metabolismo e sobrevivência das
células. Este estudo teve como objetivo identificar e descrever a(s) via(s)
metabólica(s) angiotensinérgica(s) principal(is) no hipocampo de camundongos (Mus
musculus); Estudar a regulação da cascata de sinalização PTEN/PI3K/Akt/mTOR a
partir da ativação com a Ang-(1-7) e realizar ensaios de inibição com o antagonista
do receptor Mas. Analisamos também a expressão das enzimas chave da cascata
de mTOR, com foco na enzima PTEN. Inicialmente foi realizada a identificação da
via metabólica angiotensinérgica no hipocampo de camundongos através do estudo
da atividade proteolítica angiotensinérgica com o extrato hipocampal de
camundongos Swiss para identificar as enzimas e peptídeos formados a partir de
AngI e/ou inibidores em HPLC. Para o estudo da regulação da cascata de
sinalização PTEN/PI3K/Akt/mTOR a partir da ativação/inibição do SRA os
experimentos foram realizados em células imortalizadas de neuroblastoma
denominadas SH-SY5Y e western blotting para determinação dos níveis de PTEN e
S6k (total e fosforilada). Nossos resultados mostraram que a caracterização do perfil
do sistema angiotensinérgico hipocampal gerou resultados preliminares, em que a
partir de AngI, o principal peptídeo formado foi a Ang-(1-7) e, em menor quantidade,
a Ang II. Concluímos então que a AngII pode estar sendo formada por
carboxipeptidades de forma geral e a Ang-(1-7) pode estar sendo formada por
endopeptidases. Além disso, a Ang-(1-7) provoca a diminuição da expressão da
PTEN total, bem como, a diminuição da fosforilação da PTEN, e nesse caso, a
diminuição da fosforilação significa geração de mais proteína desfosforilada e
aumento da atividade fosfatase resultando em efeitos neuroprotetores. Esses
resultados nos permitiram observar que em células SH-S5SY, o mecanismo pelo
qual a Ang-(1-7) ativa mecanismos neuroprotetores pode estar relacionado com a
ativação da enzima PTEN. === Further studies on neuromodulatory actions of angiotensins in the Renin Angiotensin
System (RAS) could improve understanding of many central nervous system
functions and disorders. The PTEN/PI3K/AKT/mTOR signaling pathway that can be
activated by Angiotensin-(1-7) plays an essential role in regulating cell growth,
metabolism and survival. The aim of this study was to identify and describe the main
angiotensinergic metabolic pathway(s) in the hippocampus of mice (Mus musculus);
Study the regulation of the PTEN/PI3K/Akt/mTOR signaling cascade from activation
with Ang-(1-7) and perform inhibition assays with the Mas receptor antagonist. We
also analyzed the expression of the key enzymes of the mTOR cascade, focusing on
the enzyme PTEN. Identification was initially performed of the angiotensinergic
metabolic pathway in the mouse hippocampus was performed by studying the
angiotensinergic proteolytic activity with the hippocampal extract of Swiss mice to
identify the enzymes and peptides formed from AngI and/or inhibitors in HPLC. For
the study of PTEN/PI3K/Akt/mTOR signaling cascade regulation from the
activation/inhibition of RAS the experiments were performed on immortalized
neuroblastoma cells called SH-SY5Y and western blotting for determination of PTEN
and S6k levels (total and phosphorylated). Our results showed that the
characterization of the profile of the hippocampal angiotensinergic system generated
preliminary results, in which from AngI, the main peptide formed was Ang-(1-7) and,
to a lesser extent, Ang II. We conclude that AngII may be formed by carboxypeptids
in general and Ang-(1-7) may be formed by endopeptidases. In addition, Ang-(1-7)
causes a decrease in total PTEN expression, as well as a decrease in PTEN
phosphorylation, in which case the decrease in phosphorylation means generation of
more dephosphorylated protein and increased phosphatase activity resulting In
neuroprotective effects. These results allowed us to observe that in SH-S5SY cells,
the mechanism by which Ang-(1-7) activates neuroprotective mechanisms may be
related to the activation of the PTEN enzyme. === Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq
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