Estudo do metabolismo de angiotensinas e mecanismos de sinalização intracelular modulados pela angiotensina (1-7) no sistema nervoso central
Mais estudos sobre ações neuromoduladoras das angiotensinas no Sistema Renina Angiotensina (SRA) poderiam melhorar a compreensão de muitas funções e distúrbios do sistema nervoso central. A via de sinalização de PTEN/PI3K/AKT/mTOR que pode ser ativada pela Angiotensina-(1-7) desempenha um papel...
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Universidade Federal de Alfenas
2018
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Sistema Renina Angiotensina Angiotensina Neuroblastoma Retinoblastoma CIENCIAS DA SAUDE::FARMACIA PEREIRA, Giorgia Lemes Estudo do metabolismo de angiotensinas e mecanismos de sinalização intracelular modulados pela angiotensina (1-7) no sistema nervoso central |
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Mais estudos sobre ações neuromoduladoras das angiotensinas no Sistema Renina
Angiotensina (SRA) poderiam melhorar a compreensão de muitas funções e
distúrbios do sistema nervoso central. A via de sinalização de
PTEN/PI3K/AKT/mTOR que pode ser ativada pela Angiotensina-(1-7) desempenha
um papel essencial na regulação do crescimento, metabolismo e sobrevivência das
células. Este estudo teve como objetivo identificar e descrever a(s) via(s)
metabólica(s) angiotensinérgica(s) principal(is) no hipocampo de camundongos (Mus
musculus); Estudar a regulação da cascata de sinalização PTEN/PI3K/Akt/mTOR a
partir da ativação com a Ang-(1-7) e realizar ensaios de inibição com o antagonista
do receptor Mas. Analisamos também a expressão das enzimas chave da cascata
de mTOR, com foco na enzima PTEN. Inicialmente foi realizada a identificação da
via metabólica angiotensinérgica no hipocampo de camundongos através do estudo
da atividade proteolítica angiotensinérgica com o extrato hipocampal de
camundongos Swiss para identificar as enzimas e peptídeos formados a partir de
AngI e/ou inibidores em HPLC. Para o estudo da regulação da cascata de
sinalização PTEN/PI3K/Akt/mTOR a partir da ativação/inibição do SRA os
experimentos foram realizados em células imortalizadas de neuroblastoma
denominadas SH-SY5Y e western blotting para determinação dos níveis de PTEN e
S6k (total e fosforilada). Nossos resultados mostraram que a caracterização do perfil
do sistema angiotensinérgico hipocampal gerou resultados preliminares, em que a
partir de AngI, o principal peptídeo formado foi a Ang-(1-7) e, em menor quantidade,
a Ang II. Concluímos então que a AngII pode estar sendo formada por
carboxipeptidades de forma geral e a Ang-(1-7) pode estar sendo formada por
endopeptidases. Além disso, a Ang-(1-7) provoca a diminuição da expressão da
PTEN total, bem como, a diminuição da fosforilação da PTEN, e nesse caso, a
diminuição da fosforilação significa geração de mais proteína desfosforilada e
aumento da atividade fosfatase resultando em efeitos neuroprotetores. Esses
resultados nos permitiram observar que em células SH-S5SY, o mecanismo pelo
qual a Ang-(1-7) ativa mecanismos neuroprotetores pode estar relacionado com a
ativação da enzima PTEN. === Further studies on neuromodulatory actions of angiotensins in the Renin Angiotensin
System (RAS) could improve understanding of many central nervous system
functions and disorders. The PTEN/PI3K/AKT/mTOR signaling pathway that can be
activated by Angiotensin-(1-7) plays an essential role in regulating cell growth,
metabolism and survival. The aim of this study was to identify and describe the main
angiotensinergic metabolic pathway(s) in the hippocampus of mice (Mus musculus);
Study the regulation of the PTEN/PI3K/Akt/mTOR signaling cascade from activation
with Ang-(1-7) and perform inhibition assays with the Mas receptor antagonist. We
also analyzed the expression of the key enzymes of the mTOR cascade, focusing on
the enzyme PTEN. Identification was initially performed of the angiotensinergic
metabolic pathway in the mouse hippocampus was performed by studying the
angiotensinergic proteolytic activity with the hippocampal extract of Swiss mice to
identify the enzymes and peptides formed from AngI and/or inhibitors in HPLC. For
the study of PTEN/PI3K/Akt/mTOR signaling cascade regulation from the
activation/inhibition of RAS the experiments were performed on immortalized
neuroblastoma cells called SH-SY5Y and western blotting for determination of PTEN
and S6k levels (total and phosphorylated). Our results showed that the
characterization of the profile of the hippocampal angiotensinergic system generated
preliminary results, in which from AngI, the main peptide formed was Ang-(1-7) and,
to a lesser extent, Ang II. We conclude that AngII may be formed by carboxypeptids
in general and Ang-(1-7) may be formed by endopeptidases. In addition, Ang-(1-7)
causes a decrease in total PTEN expression, as well as a decrease in PTEN
phosphorylation, in which case the decrease in phosphorylation means generation of
more dephosphorylated protein and increased phosphatase activity resulting In
neuroprotective effects. These results allowed us to observe that in SH-S5SY cells,
the mechanism by which Ang-(1-7) activates neuroprotective mechanisms may be
related to the activation of the PTEN enzyme. === Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq |
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ndltd-IBICT-oai-10.254.254.39-tede-11222019-01-22T03:41:06Z Estudo do metabolismo de angiotensinas e mecanismos de sinalização intracelular modulados pela angiotensina (1-7) no sistema nervoso central PEREIRA, Giorgia Lemes PEREIRA, Marília Gabriella Alves Goulart http://lattes.cnpq.br/7691594533284914 CHAMA, Laura Letícia de Freitas RODRIGUES, Maria Rita Sistema Renina Angiotensina Angiotensina Neuroblastoma Retinoblastoma CIENCIAS DA SAUDE::FARMACIA Mais estudos sobre ações neuromoduladoras das angiotensinas no Sistema Renina Angiotensina (SRA) poderiam melhorar a compreensão de muitas funções e distúrbios do sistema nervoso central. A via de sinalização de PTEN/PI3K/AKT/mTOR que pode ser ativada pela Angiotensina-(1-7) desempenha um papel essencial na regulação do crescimento, metabolismo e sobrevivência das células. Este estudo teve como objetivo identificar e descrever a(s) via(s) metabólica(s) angiotensinérgica(s) principal(is) no hipocampo de camundongos (Mus musculus); Estudar a regulação da cascata de sinalização PTEN/PI3K/Akt/mTOR a partir da ativação com a Ang-(1-7) e realizar ensaios de inibição com o antagonista do receptor Mas. Analisamos também a expressão das enzimas chave da cascata de mTOR, com foco na enzima PTEN. Inicialmente foi realizada a identificação da via metabólica angiotensinérgica no hipocampo de camundongos através do estudo da atividade proteolítica angiotensinérgica com o extrato hipocampal de camundongos Swiss para identificar as enzimas e peptídeos formados a partir de AngI e/ou inibidores em HPLC. Para o estudo da regulação da cascata de sinalização PTEN/PI3K/Akt/mTOR a partir da ativação/inibição do SRA os experimentos foram realizados em células imortalizadas de neuroblastoma denominadas SH-SY5Y e western blotting para determinação dos níveis de PTEN e S6k (total e fosforilada). Nossos resultados mostraram que a caracterização do perfil do sistema angiotensinérgico hipocampal gerou resultados preliminares, em que a partir de AngI, o principal peptídeo formado foi a Ang-(1-7) e, em menor quantidade, a Ang II. Concluímos então que a AngII pode estar sendo formada por carboxipeptidades de forma geral e a Ang-(1-7) pode estar sendo formada por endopeptidases. Além disso, a Ang-(1-7) provoca a diminuição da expressão da PTEN total, bem como, a diminuição da fosforilação da PTEN, e nesse caso, a diminuição da fosforilação significa geração de mais proteína desfosforilada e aumento da atividade fosfatase resultando em efeitos neuroprotetores. Esses resultados nos permitiram observar que em células SH-S5SY, o mecanismo pelo qual a Ang-(1-7) ativa mecanismos neuroprotetores pode estar relacionado com a ativação da enzima PTEN. Further studies on neuromodulatory actions of angiotensins in the Renin Angiotensin System (RAS) could improve understanding of many central nervous system functions and disorders. The PTEN/PI3K/AKT/mTOR signaling pathway that can be activated by Angiotensin-(1-7) plays an essential role in regulating cell growth, metabolism and survival. The aim of this study was to identify and describe the main angiotensinergic metabolic pathway(s) in the hippocampus of mice (Mus musculus); Study the regulation of the PTEN/PI3K/Akt/mTOR signaling cascade from activation with Ang-(1-7) and perform inhibition assays with the Mas receptor antagonist. We also analyzed the expression of the key enzymes of the mTOR cascade, focusing on the enzyme PTEN. Identification was initially performed of the angiotensinergic metabolic pathway in the mouse hippocampus was performed by studying the angiotensinergic proteolytic activity with the hippocampal extract of Swiss mice to identify the enzymes and peptides formed from AngI and/or inhibitors in HPLC. For the study of PTEN/PI3K/Akt/mTOR signaling cascade regulation from the activation/inhibition of RAS the experiments were performed on immortalized neuroblastoma cells called SH-SY5Y and western blotting for determination of PTEN and S6k levels (total and phosphorylated). Our results showed that the characterization of the profile of the hippocampal angiotensinergic system generated preliminary results, in which from AngI, the main peptide formed was Ang-(1-7) and, to a lesser extent, Ang II. We conclude that AngII may be formed by carboxypeptids in general and Ang-(1-7) may be formed by endopeptidases. In addition, Ang-(1-7) causes a decrease in total PTEN expression, as well as a decrease in PTEN phosphorylation, in which case the decrease in phosphorylation means generation of more dephosphorylated protein and increased phosphatase activity resulting In neuroprotective effects. These results allowed us to observe that in SH-S5SY cells, the mechanism by which Ang-(1-7) activates neuroprotective mechanisms may be related to the activation of the PTEN enzyme. Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq 2018-04-20T12:42:35Z 2017-08-30 info:eu-repo/semantics/publishedVersion info:eu-repo/semantics/masterThesis PEREIRA, Giorgia Lemes. Estudo do metabolismo de angiotensinas e mecanismos de sinalização intracelular modulados pela angiotensina (1-7) no sistema nervoso central. 2017. 70 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Farmacêuticas) - Universidade Federal de Alfenas, Alfenas, MG, 2017. https://bdtd.unifal-mg.edu.br:8443/handle/tede/1122 por http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ info:eu-repo/semantics/openAccess application/pdf Universidade Federal de Alfenas Instituto de Ciências Biomédicas Brasil UNIFAL-MG Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UNIFAL instname:Universidade Federal de Alfenas instacron:UNIFAL |