Efeitos modulatórios de frações do extrato somático de Trichuris trichiura em células mononucleares do sangue periférico
Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandar@gmail.com) on 2013-08-14T20:57:37Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Leonardo Nascimento Santos.pdf: 1769409 bytes, checksum: 84530b31d51dfec9bf3c5617b8fb1217 (MD5) === Made available in DSpace on 2013-08-14T20:57:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertaç...
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ndltd-IBICT-oai-192.168.11-11-ri-125812018-10-07T07:41:30Z Efeitos modulatórios de frações do extrato somático de Trichuris trichiura em células mononucleares do sangue periférico Santos, Leonardo Nascimento Alcântara-Neves, Neuza Maria Carvalho, Lain Carlos Pontes de Imunomodulação; Trichuris trichiura - Frações do extrato; CMSP; Citocinas. Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandar@gmail.com) on 2013-08-14T20:57:37Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Leonardo Nascimento Santos.pdf: 1769409 bytes, checksum: 84530b31d51dfec9bf3c5617b8fb1217 (MD5) Made available in DSpace on 2013-08-14T20:57:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Leonardo Nascimento Santos.pdf: 1769409 bytes, checksum: 84530b31d51dfec9bf3c5617b8fb1217 (MD5) CAPES; FAPESB Estudos epidemiológicos e experimentais indicam que helmintos regulam respostas imunes a aeroalérgenos através da estimulação de uma rede de regulatória. Tem sido relatado que infecção por T. trichiura e outros trichuroides levam à proteção contra atopia, doenças alergicas e autoimunes. O objetivo deste estudo foi identificar frações do extrato somático de T. trichiura (TtEFs) com atividade imunomodulatória, avaliando seus efeitos sobre a produção de citocinas por células mononucleares do sangue periférico (CMSP) de doadores saudáveis. Quatorze TtEFs (TtEF1 a TtEF14) foram obtidos pelo fracionamento do extrato somático de T. trichiura por cromatografia líquida de troca iônica. Para avaliar o efeito estimulatório das TtEFs sobre a produção de citocinas (IL-10, IL-12 p40, TNF-α, IL-5 e IL-13) por CMSP, essas células foram obtidas de doadores saudáveis e cultivados na presença das TtEFs (50 ug de proteína/mL). Efeitos inibitórios foram avaliados por incubação das células com as TtEFs e: (a) uma concentração subótima de LPS (4 UE/mL), para IL-10 e TNF-α, (b) LPS e interferon (IFN) γ (100 ηg/mL), para IL-12 p40, e (c) fitohemaglutinina (5 μg/mL), para IL-5 e IL-13. As citocinas foram quantificados por ELISA de captura. Oito das frações (TtEF6, TtEF8 a TtEF14), bem como o extrato somático de T. Trichiura, induziram a produção de IL-10, TNF-α e, em menor quantidade, IL-12 p40. Três das frações (TtEF8, TtEF9 e TtEF10) não induziram significantemente a produção de IL-12 p40. Nenhuma das frações estimulou a produção de IL-13. Estas oito frações que estimularam a produção de IL-10 foram analisados por eletroforese em gel de poliacrilamida na presença de dodecilsulfato de sódio e para a atividade inibitória sobre a produção de citocinas por CMSP estimuladas. Todas as frações inibiram a produção de pelo menos uma citocina, mas nenhuma delas inibiu a produção de IL-10. Apenas uma das frações (TtEF9) inibiu significativamente a produção de todas as outras citocinas analisadas. TtEF10 inibiu a produção de TNF-α, IL-5 e IL-13; TtEF11 reduziu a produção de ambos TNF-α e IL-12 p40; três frações (TtEF6, TtEF12 e TtEF13) inibiram apenas a produção de TNF- α e duas frações (TtEF8 e TtEF14) inibiram significativamente apenas a produção de IL-5. Os resultados obtidos indicam que T. trichiura produz mais de uma molécula com atividade imunomodulatórias. TtEF9, que, além de estimular a produção de IL-10, sub-regula a produção de todas as outras citocinas estudadas, é o melhor candidato para conter uma molécula imunoregulatória que deve ser caracterizada e purificada à homogeneidade, a fim de investigar a sua utilização como um agente terapêutico para doenças imunomediadas. Salvador 2013-08-14T20:57:37Z 2013-08-14T20:57:37Z 2013-08-14 info:eu-repo/semantics/publishedVersion info:eu-repo/semantics/masterThesis http://www.repositorio.ufba.br/ri/handle/ri/12581 por info:eu-repo/semantics/openAccess reponame:Repositório Institucional da UFBA instname:Universidade Federal da Bahia instacron:UFBA |
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aeroalérgenos através da estimulação de uma rede de regulatória. Tem sido relatado que infecção
por T. trichiura e outros trichuroides levam à proteção contra atopia, doenças alergicas e autoimunes.
O objetivo deste estudo foi identificar frações do extrato somático de T. trichiura
(TtEFs) com atividade imunomodulatória, avaliando seus efeitos sobre a produção de citocinas
por células mononucleares do sangue periférico (CMSP) de doadores saudáveis. Quatorze TtEFs
(TtEF1 a TtEF14) foram obtidos pelo fracionamento do extrato somático de T. trichiura por
cromatografia líquida de troca iônica. Para avaliar o efeito estimulatório das TtEFs sobre a
produção de citocinas (IL-10, IL-12 p40, TNF-α, IL-5 e IL-13) por CMSP, essas células foram
obtidas de doadores saudáveis e cultivados na presença das TtEFs (50 ug de proteína/mL).
Efeitos inibitórios foram avaliados por incubação das células com as TtEFs e: (a) uma
concentração subótima de LPS (4 UE/mL), para IL-10 e TNF-α, (b) LPS e interferon (IFN) γ
(100 ηg/mL), para IL-12 p40, e (c) fitohemaglutinina (5 μg/mL), para IL-5 e IL-13. As citocinas
foram quantificados por ELISA de captura. Oito das frações (TtEF6, TtEF8 a TtEF14), bem
como o extrato somático de T. Trichiura, induziram a produção de IL-10, TNF-α e, em menor
quantidade, IL-12 p40. Três das frações (TtEF8, TtEF9 e TtEF10) não induziram
significantemente a produção de IL-12 p40. Nenhuma das frações estimulou a produção de IL-13.
Estas oito frações que estimularam a produção de IL-10 foram analisados por eletroforese em gel
de poliacrilamida na presença de dodecilsulfato de sódio e para a atividade inibitória sobre a
produção de citocinas por CMSP estimuladas. Todas as frações inibiram a produção de pelo
menos uma citocina, mas nenhuma delas inibiu a produção de IL-10. Apenas uma das frações
(TtEF9) inibiu significativamente a produção de todas as outras citocinas analisadas. TtEF10
inibiu a produção de TNF-α, IL-5 e IL-13; TtEF11 reduziu a produção de ambos TNF-α e IL-12
p40; três frações (TtEF6, TtEF12 e TtEF13) inibiram apenas a produção de TNF- α e duas
frações (TtEF8 e TtEF14) inibiram significativamente apenas a produção de IL-5. Os resultados
obtidos indicam que T. trichiura produz mais de uma molécula com atividade
imunomodulatórias. TtEF9, que, além de estimular a produção de IL-10, sub-regula a produção
de todas as outras citocinas estudadas, é o melhor candidato para conter uma molécula
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