| Summary: | Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2016-08-04T19:10:35Z
No. of bitstreams: 2
Dissertação - Lucas Luiz de Lima Silva - 2016.pdf: 2502108 bytes, checksum: 9af274c5556e225e1478c978f79254ad (MD5)
license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) === Approved for entry into archive by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2016-08-04T19:11:54Z (GMT) No. of bitstreams: 2
Dissertação - Lucas Luiz de Lima Silva - 2016.pdf: 2502108 bytes, checksum: 9af274c5556e225e1478c978f79254ad (MD5)
license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) === Made available in DSpace on 2016-08-04T19:11:54Z (GMT). No. of bitstreams: 2
Dissertação - Lucas Luiz de Lima Silva - 2016.pdf: 2502108 bytes, checksum: 9af274c5556e225e1478c978f79254ad (MD5)
license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5)
Previous issue date: 2016-05-13 === Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES === Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq === American Tegumentary Leishmaniasis (ATL) is a disease caused by Leishmania
protozoan, belonging to the subgenus Viannia and Leishmania. In Brazil, the most
common and prevalent species is L. (V.) braziliensis. In patients with ATL, it was detected
the expression of interleukin 32 (IL-32) in skin or mucosal lesions caused by L. Viannia
spp. However, the role of IL-32 on ATL is still unclear. It has been shown that IL-15
induces IL-32 and also IL-15 leads to L. infantum control. This study aimed to investigate
the effects of IL-32 and IL-15 in the production of cytokines and microbicidal activity of
primary human macrophages infected with L. (V.) braziliensis. For this, human peripheral
blood monocytes were derived into macrophages and infected with metacyclic forms of L.
(V.) braziliensis; evaluation of the infection index (4 h, phagocytosis, 48 h, microbicidal
activity) in the absence or presence of rIL-32, rIL-15 or gamma interferon (rIFN) and
lipopolysaccharide (LPS); in culture supernatants, IL-32, tumor necrosis factor (TNF) and
IL-10 were measured by enzime-linked immunoassay. The addition of rIL-32 to
macrophages did not significantly altered phagocytosis of the parasites or microbicidal
activity of macrophages. Classical activation of macrophages with rIFN plus LPS
decreased the infection index. rIL-32 em high concentration (200 ng/mL) was able to
induce TNF in uninfected or infected macrophages, and IL-10 was not induced. Parasites
induced lower amounts of intracellular IL-32 as well as rIFN0.1 ng / ml), but there was a
synergism between the activation signals provided by the parasites and rIFN (0.1 ng /
ml). In the opposite, rIFN in higher concentration (10 ng/mL) induced higher amounts of
IL-32, but its activity was partially inhibited by parasites. The rIL-15 was able to induce IL-
32 and TNF in macrophages, but not IL-10 in both non-infected or infected macrophages.
The rIL-15 also decreased phagocytosis of parasites by macrophages and increased the
microbicidal activity of these cells. The data suggest that IL-15 induces IL-32 and TNF
which can contribute to control of the infection. To evaluate the leishmanicidal mechanism
pathways induced by IL-15 and IL-32 can help in the development of new therapies for
the control of ATL. === A leishmaniose tegumentar americana (LTA) é uma doença infectoparasitária
causada por protozários Leishmania, pertencentes aos subgêneros Viannia e
Leishmania. No Brasil, a espécies mais comum e prevalente é L. (V.) braziliensis. Em
pacientes com LTA, foi detectada a expressão da citocina interleucina 32 (IL-32) nas
lesões cutâneas ou mucosas causadas por L. Viannia spp. No entanto, o papel da IL-32
na LTA ainda não foi esclarecido. Foi demonstrado que a IL-15 induz IL-32, além disso a
IL-15 leva à morte de L. infantum. O presente estudo teve como objetivo investigar os
efeitos da IL-32 e IL-15 na produção de citocinas e na atividade microbicida de
macrófagos humanos primários infectados com L. (V.) braziliensis. Para isto, foi realizada
a derivação de macrófagos humanos a partir de monócitos do sangue periférico de
doadores não infectados e infecção com formas metacíclicas de L. (V.) braziliensis;
avaliação do índice de infecção (4 h, fagocitose; 48 h, atividade microbicida), na
ausência ou presença de tratamento com rIL-32, rIL-15 ou interferon gama (rIFN) e
lipopolissacarídeo (LPS); e avaliação da produção de citocinas IL-32, fator de necrose
tumoral (TNF) e IL-10, por ensaio imunoenzimático. A adição de rIL-32 às culturas de
macrófagos primários infectados com L. (V.) braziliensis não alterou significantemente a
fagocitose ou a atividade microbicida das células. A ativação clássica dos macrófagos
com rIFN e LPS resultou em uma diminuição do índice de infecção. A rIL-32 em
elevada concentração foi capaz de induzir TNF nos macrófagos não infectados ou
infectados pelos parasitos L. (V.) braziliensis, sendo que não foi induzida produção de IL-
10. Os parasitos L. (V.) braziliensis induziram baixas quantidades de IL-32 intracelular,
assim como rIFN0,1 ng/mL), porém houve sinergismo entre os sinais de ativação
fornecidos pelos parasitos e os do rIFN (0,1 ng/mL). O rIFN em uma concentração mais
elevada (10 ng/mL) induziu maiores quantidades de IL-32, porém esta indução foi
parcialmente inibida pela infecção com os parasitos. A rIL-15 foi capaz de induzir IL-32
nos macrófagos e, além disso, induziu TNF e não induziu a produção de IL-10, tanto nos
macrófagos infectados quanto não infectados. A rIL-15 também diminuiu a fagocitose
dos parasitos pelos macrófagos e aumentou a atividade microbicida destes. Os dados
sugerem que a IL-15 induz IL-32 e TNF que podem contribuir para o controle da
infecção. Avaliar as vias de ativação de mecanismos leishmanicidas induzidos pelas IL-
15 e IL-32 podem auxiliar no desenvolvimento de novas terapias para o controle da LTA.
|
|---|
