| Summary: | Made available in DSpace on 2014-06-12T18:02:03Z (GMT). No. of bitstreams: 2
arquivo3634_1.pdf: 1182297 bytes, checksum: 555f62e24f992ab833cb18ef506968ae (MD5)
license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5)
Previous issue date: 2009 === Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico === A levedura Dekkera bruxellensis foi identificada como principal contaminante dos
processos de fermentação alcoólica em destilarias do Brasil, do Canadá e dos EUA.
Contagens elevadas desta levedura podem resultar em diminuição da produtividade
etanólica, com conseqüente prejuízo econômico. Recentemente, esta levedura teve
seu genoma parcialmente seqüenciado e foram identificadas seqüências
correspondentes a genes do metabolismo do nitrato. A presença de tais genes
indica que D. bruxellensis possa usufruir deste composto como fonte de nitrogênio,
ao contrário de Saccharomyces cerevisiae, durante o processo fermentativo. Como
estas leveduras competem no ambiente industrial, a presença de nitrato poderia ser
um fator diferencial na adaptação de D. bruxellensis, visto que esta fonte pode estar
presente no caldo de cana proveniente do processo de adubação da cana de
açúcar. Assim, os objetivos deste trabalho foram analisar o perfil de expressão dos
genes da via metabólica do nitrato de D. bruxellensis em meios laboratoriais e
verificar se esta levedura expressa estes genes em caldo de cana industrial
utilizando a técnica de PCR quantitativa (qPCR). As células de D. bruxellensis foram
cultivadas em meios sintéticos contendo glicose como fonte de carbono na presença
de amônia, de nitrato ou ambas as fontes. As células foram coletadas em pontos
específicos para extração do RNA, síntese de cDNA e analise por qPCR utilizando o
método 2-ΔΔCt para quantificação da expressão gênica. Como controle endógeno foi
empregado o gene EFA1. Todos os quatro genes estudados apresentaram indução
de sua expressão na presença de nitrato e foram sujeitos à repressão catabólica do
nitrogênio quando a amônia estava presente no meio. Adicionalmente, a presença e
o consumo de nitrato no caldo de cana foram investigados. Neste substrato, os
genes apresentaram perfil de expressão diferente do observado nos meios YNB. O
nitrato foi detectado no caldo de cana e seu consumo ao longo do tempo foi
determinado. Este estudo comprova que os genes da assimilação do nitrato em D.
bruxellensis são induzidos em presença deste composto e reprimidos na presença
de amônia. As células de D. bruxellensis expressaram estes genes no caldo de
cana. Entretanto, maiores estudos acerca da regulação da expressão dos genes
desta via metabólica ainda são necessários para correlacionar esta expressão com a
adaptação de D. bruxellensis no meio de fermentação alcoólica
|
|---|
