Mecanismo antiinflamatÃrio do peptÃdeo mimÃtico da ApolipoproteÃna E (COG 133) na recuperaÃÃo da mucosite intestinal induzida por 5-Fluoruracil em camundongos Swiss.

• Main Author: Orleancio Gomes Ripardo de Azevedo
• Other Authors: Reinaldo Barreto OriÃ
• Format: Others
• Language: Portuguese
• Published: Universidade Federal do Cearà 2010
• Subjects: ApoliproteÃna E; Mucositis; Apolipoprotein E; cytokine; FARMACOLOGIA
• Online Access: http://www.teses.ufc.br/tde_busca/arquivo.php?codArquivo=5358

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico === O cÃncer à uma doenÃa grave que atinge milhares de pessoas no mundo, possuindo altos Ãndices de morbidade e mortalidade. Atualmente existem diversos alvos terapÃuticos no tratamento do cÃncer, um deles reside no fato de inibir a replicaÃÃo do DNA impossibilitando a cÃlula tumoral de se duplicar como à o caso do 5-fluoruracil (5-FU).O objetivo do trabalho foi avaliar o efeito antiinflamatÃrio do peptÃdeo mimÃtico da ApoE (COG 133) em camundongos Swiss desafiados pela mucosite intestinal induzida pelo 5-FU. Utilizamos camundongos Swiss machos com peso de 30g, sendo desafiados com injeÃÃo (dose Ãnica) intraperitoneal de 5-FU (450 mg/kg).Alguns animais foram tratados com diferentes doses (0,3, 1,0 e 3,0 ÂM) do peptÃdeo mimÃtico da apolipoproteÃna E (ApoE) COG133 por via intra-peritoneal, apÃs o desafio com 5-FU. Animais tratados com PBS foram usados como controles. Os camundongos foram sacrificados com soluÃÃo de deslocamento cervical 3 dias apÃs o desafio com 5-FU.Algumas amostras de intestino foram congeladas imediatamente em nitrogÃnio lÃquido e em seguida armazenadas em freezer a -80ÂC para biologia molecular. Outras amostras foram fixadas em formaldeÃdo para processamento histolÃgico.Monitoramos o peso corporal dos animais e fizemos leucometria a partir de coleta retrorbital de sangue para avaliaÃÃo do efeito citotÃxico mielosupressor do 5-FU nos grupos experimentais.Avaliamosos parÃmetros morfomÃtricos de altura de vilo e profundidade de cripta em segmentos do duodeno. Para a detecÃÃo de proteÃnas de interesse, utilizamos o Western blot com a utilizaÃÃo dos seguintes anticorpos IL-1&#946;, TNF-&#945; e iNOS. Para o RT-PCR, avaliamos os seguintes primers IL-1&#946;, TNF-&#945; e iNOS. No ensaio de citocinas por ELISA, utilizamos os seguintes anticorpos IL-1&#946;, IL-10, TNF-&#945;. Nas anÃlises morfomÃtricas de duodeno, encontramos uma grande reduÃÃo na altura de vilos e profundidade de criptas nosanimais tratados com 5-FU, que foi reduzida com com a utilizaÃÃo do peptÃdeo COG133 na dose 3,0 ÂM (p<0,001).Nas anÃlises histopatolÃgicas, observamos um intensoinfiltrado inflamatÃrio nos animais do grupo que foi injetadocomo 5-FU, que foi parcialmente revertido pela administraÃÃo do peptÃdeo COG133.Os dados de ELISA evidenciaram um aumento da quantidade de citocinas prÃ-inflamatÃrias IL-1&#946; (p<0,05), TNF-&#945; (p<0,05) e uma reduÃÃo da citocina antiinflamatÃria IL-10 (p<0,05), quando comparados ao controle salina, em duodenos de animais que foram injetados com 5-FU. A administraÃÃo do peptÃdeo COG 133 reduziu os nÃveis de IL-1&#946; de maneira estatisticamente significante (p<0,05 1&#956;M; p<0,001 3&#956;M), TNF-&#945; (p<0,001 na dose de 1,0 &#956;M); p<0,001 na dose de 3&#956;M) e para IL-10 (p<0,001 na dose de 3&#956;M).Dados de Western blot evidenciam que o peptÃdeo na dose de 3&#956;M reduziu de maneira estatisticamente significante a expressÃo de citocinas como IL-1&#946; (p<0,001), TNF-&#945; (p<0,05) e do mediador inflamatÃrio iNOS (p<0,05) no duodeno. Pelo protocolo de RT-PCR,encontramos uma elevaÃÃo na expressÃo do transcrito para TNF-&#945; e iNOS nos animais injetados com 5-FU, o que foi parcialmente diminuÃdo pela administraÃÃo do peptÃdeo na dose de 3&#956;M para TNF-&#945; (p<0,05) e iNOS (p<0,05)pelo ANOVA.A partir dos nossos achados, podemos concluir que o peptÃdeo mimÃtico da ApoE (COG 133) possui uma aÃÃo anti-inflamatÃria, especialmente no segmento duodeno, visto que reduz a expressÃo de citocinas prÃ-inflamatÃrias de animais desafiados, dessa forma sugerindo sua utilizaÃÃo em humanos com mucosite intestinal sob quimio/radioterapia.