| Summary: | The von Hippel Lindau protein (pVHL) is a tumor suppressor that is known to play an important role in clear cell renal cell cancer (ccRCC) development. Many efforts towards understanding the role of pVHL in ccRCC have focused on characterizing its function in HIF degradation and extracellular matrix (ECM) remodeling. The purpose of the current study was to characterize the molecular mechanism by which pVHL regulates assembly of the ECM. To this end, we defined three objectives. First, we sought to determine if pVHL's role as a ubiquitin ligase was independent of its role as a regulator of ECM assembly. Second, in the hope of mimicking the defective ECM that is observed in pVHL null cells, we down-regulated type IV collagen in cells expressing wild type pVHL and then measured the ability of these cells to invade ECM in vitro. Lastly, we aimed to identify the specific binding site of pVHL on alpha 2 collagen type IV. Based on our results, we were able to conclude that pVHL's ubiquitin ligase function is independent of its function in ECM regulation. We also found that decreasing type IV collagen in 786-0 cells resulted in a decreased ability of these cells to invade the ECM. Lastly, we determined that pVHL binds to a 120kDa COL4A2 species. === La protéine von Hippel Lindau (pVHL) est un suppresseur de tumeur qui joue un role intégrale dans le développement de ccRCC. À date, plusieurs efforts ont été dirigés pour mieux comprendre ce role en tant que charactérizer sa function dans la dégradation de HIF et durant le processus de remodeler de la matrice extra-cellulaire (MEC). Le but de notre recherche était de charactérizer le méchanisme moléculaire par laquelle pVHL règle l'assemblée de la MEC. Pour attainder ce but, nous avons établis trois objectifs. Premièrement, nous avons voulu cerner si le role dont pVHL joue comme ubiquitine-ligase est indépendant de son role comme régleur de l'assemblée de la MEC. Deuxièmement, dans l'espoir de mimer la MEC défectueuse qui est observée avec les cellules qui n'expriment pas pVHL, nous avons diminué l'expression de collagène type IV dans les cellules dans lesquels pVHL est exprimé et nous avons mesuré la capacité de ces cellules à envahir une matrice artificielle. Finalement, nous avons visé à identifier le site d'intéraction spécifique de pVHL sur COL4A2. Nous étions capables de conclure que l'activité de ligase associée avec pVHL fonctionne indépendamment de sa fonction dans la régulation de la MEC. Nous avons aussi trouvé qu'en diminuant l'expression de collagène type IV dans les cellules 786-0, nous avons réussi à diminuer la capacité de ces cellules à envahir la MEC. Finalement, nous avons trouvé que pVHL intéragit avec un morceau de COL4A2 de 120kDa.
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