| Summary: | L'ubiquitination est une modification post-traductionnelle qui joue un rôle central dans
divers processus biologiques. Elle peut être contrecarrée par les déubiquitinases
(DUBs). "BRCA1-Associated Protein 1" (BAP1) est une déubiquitinase, qui fait partie
de complexes multiprotéiques, possèdant une fonction de suppression tumorale ainsi
qu'un potentiel anti-métastatique. De plus, BAP1 est phosphorylée suite aux dommages
à l’ADN par les kinases ATM/ATR.
En nous basant sur ces données, nous avons purifié les protéines associées à BAP1 dans
des conditions de stress génotoxique. Bien que la composition du complexe et l’activité
DUB semblent inchangées, nous avons pu identifier des changements critiques dans les
niveaux et les sites de phosphorylation, confirmant la régulation de BAP1 suite aux
dommages à l’ADN.
En déplétant BAP1 par ARNi et en utilisant des mutants dominants négatifs, nous avons
obtenu des résultats suggèrant que suite au stress génotoxique, cette DUB est requise
pour prolonger le point de contrôle en G2/M et ce, en retardant la reprise du cycle
cellulaire. D'un autre côté, l'expression de BAP1 dans des cellules cancéreuses qui en
sont déficientes restore une ploïdie normale et diminue la fréquence d'aberrations
nucléaires, suggérant que cette protéine joue un rôle dans la stabilité génomique.
Nos résultats suggèrent fortement que BAP1 joue un rôle dans la réponse des cellules au
stress génotoxique et la stabilité génomique. Nos travaux permettront ainsi d’identifier
et de caractériser les voies de signalisation cellulaire régulant l’activité et la fonction de
BAP1 durant les périodes d’exposition à des agents qui endommagent l’ADN. Les
connaissances acquises seront donc d’une valeur tangible pour nôtre compréhension de
la mutagenèse induite par des agents carcinogènes, un déterminant clé de la formation
des tumeurs. === Ubiquitination is a reversible, covalent post-translational modification that regulates
protein function and as such plays crucial roles in a wide range of physiological
processes. Importantly, gain- or loss-of-function mutations in components of the
ubiquitin system have been causally linked to tumorigenesis. The reverse reaction of
ubiquitination is catalyzed by deubiquitinases (DUBs), a family of enzymes that
removes ubiquitin from proteins.
BRCA1-Associated Protein 1 (BAP1) is a deubiquitinase known to be a tumor
suppressor and anti-metastatic protein since deletions and rearrangements are observed
in a wide range of tumors. However, little is known about how BAP1 works into the
cells. Here, we show that BAP1 is hyperphosphorylated after DNA damage by gamma
radiations and ultraviolet light, probably by ATM and/or ATR. Moreover, we found that
BAP1 depletion cause a defect in the maintenance of the G2/M checkpoint after gamma
radiation, suggesting that BAP1 is required to maintain the arrest after DNA damage.
This delay is important to allow DNA repair and to prevent genomic instability.
Consistently, we found that BAP1 expression in BAP1 deficient cells restore normal
diploidy and prevent nuclear aberrations, suggesting that BAP1 links DNA damage
induced checkpoint regulation to genomic stability: two important processes for
carcinogenesis.
These findings provide new insights into the role of deubiquitination in cell signaling
and neoplastic transformation.
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