Caractérisation de la structure et de la dynamique par RMN en solution de la protéine de capside du virus de la mosaïque de la papaye

• Main Author: Lecours, Katia
• Other Authors: Gagné, Stéphane
• Format: Dissertation
• Language: French
• Published: Université Laval 2007
• Subjects: QU 7.5 UL 2007; Virus de la mosaïque de la papaye; Capside; Résonance magnétique nucléaire
• Online Access: http://hdl.handle.net/20.500.11794/19682

Le virus de la mosaïque de la papaye (PapMV) est un virus filamenteux flexible dont son unique protéine structurale est la protéine de capside (CP), composée de 215 acides aminés. La structure tertiaire de cette protéine, tout comme celle de ses homologues, n'est pas connue. Le but de ce projet est de caractériser la structure et la dynamique de la PapMV CP par RMN multidimensionnelle. Afin d'y arriver, une forme de protéine utilisable pour la RMN, d'un poids moléculaire évitant d'outrepasser les 30 kDa, a d'abord été identifiée : la PapMV CP27-215. Un protocole d'expression à haut rendement a été développé et nous avons marqué cette protéine avec le 15N et le 13C, ce qui impliquent une expression en milieu minimum. La RMN est aussi une méthode qui exige une très grande pureté de la protéine. Par conséquent, une approche de purification efficace a été développée. En plus d'une protéine pure et marquée, la RMN exige que celle-ci soit soluble, concentrée et stable. Ces exigences ont été répondues afin de répondre à l'objectif premier de ce projet.