PAN, SHAO-ZHI
碩士 === 國立中興大學 === 植物學研究所 === 73 === Xanthomonas campestris pv campestris(XC11)為引起十字花科黑腐病之病原細菌 。為了了解此菌之扛化、遺傳等方面之特性,必須先得到該菌之各類突變株,以供進 一步做生化及遺傳分析上的研究。 轉移子誘變是當轉移子進人菌體後,會插入細菌之染色體,而被轉移子插入處之基因 即被破壞而造成突變。以此方法所得之突變株回變率低...
Main Authors: | , |
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Other Authors: | |
Format: | Others |
Language: | zh-TW |
Online Access: | http://ndltd.ncl.edu.tw/handle/60159208740800897462 |
Summary: | 碩士 === 國立中興大學 === 植物學研究所 === 73 === Xanthomonas campestris pv campestris(XC11)為引起十字花科黑腐病之病原細菌
。為了了解此菌之扛化、遺傳等方面之特性,必須先得到該菌之各類突變株,以供進
一步做生化及遺傳分析上的研究。
轉移子誘變是當轉移子進人菌體後,會插入細菌之染色體,而被轉移子插入處之基因
即被破壞而造成突變。以此方法所得之突變株回變率低,無多重突變之弊,且因其具
有抗藥基因,可做為進一步之遺傳實驗可利用之marker。
本篇論文選用Tn5(抗Kanamycin)進行誘變,攜帶Tn5 之質體為PJB4JI及PSU2021 。
首先以E. coli 1830(PJB4JI)與XC11(RIFR)進行接合作用,可得到許多抗Km及
Rif 之transcomjugants 。但因: (1)選到transconjugants 之機率太高(高於一般
轉移子誘變頻率)。 (2)以此transconjugants 再與XC11(Nalr)進行接合作用,仍
得到具有PJB4JI之transconjugants。(3)將transconjugants 之DNA 分離出來經過鑑
識切割後與Tn5 prube 進行hybridization 等三項結果顯示,PJB4JI穩定存留於
XC11中而大幅降低找到突變株之頻率。為得到較多之突變株,故改用PSUP2021為攜帶
Tn5 之質體,與XC11(rifr)進行接合作用後,可成功地找到下列四類突變株: (1)
營養需求株 (2)色素突變株 (3)EPS 突變株 (4)缺乏澱粉分解*之突變株,本論文對
這些突變株做了初步之分析研究。
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