PAN, SHAO-ZHI

• Main Authors: PAN, SHAO-ZHI, 潘詔智
• Other Authors: ZENG, YI-XIONG
• Format: Others
• Language: zh-TW
• Online Access: http://ndltd.ncl.edu.tw/handle/60159208740800897462

碩士 === 國立中興大學 === 植物學研究所 === 73 === Xanthomonas campestris pv campestris（XC11）為引起十字花科黑腐病之病原細菌 。為了了解此菌之扛化、遺傳等方面之特性，必須先得到該菌之各類突變株，以供進 一步做生化及遺傳分析上的研究。 轉移子誘變是當轉移子進人菌體後，會插入細菌之染色體，而被轉移子插入處之基因 即被破壞而造成突變。以此方法所得之突變株回變率低，無多重突變之弊，且因其具 有抗藥基因，可做為進一步之遺傳實驗可利用之marker。 本篇論文選用Tn5（抗Kanamycin）進行誘變，攜帶Tn5 之質體為PJB4JI及PSU2021 。 首先以E. coli 1830（PJB4JI）與XC11（RIFR）進行接合作用，可得到許多抗Km及 Rif 之transcomjugants 。但因： (1)選到transconjugants 之機率太高（高於一般 轉移子誘變頻率）。 (2)以此transconjugants 再與XC11（Nalr）進行接合作用，仍 得到具有PJB4JI之transconjugants。(3)將transconjugants 之DNA 分離出來經過鑑 識切割後與Tn5 prube 進行hybridization 等三項結果顯示，PJB4JI穩定存留於 XC11中而大幅降低找到突變株之頻率。為得到較多之突變株，故改用PSUP2021為攜帶 Tn5 之質體，與XC11（rifr）進行接合作用後，可成功地找到下列四類突變株： (1) 營養需求株 (2)色素突變株 (3)EPS 突變株 (4)缺乏澱粉分解＊之突變株，本論文對 這些突變株做了初步之分析研究。