Candida albicans細胞表面的超顯微構造抗原定位, 及抗原黏著素特性之研究
碩士 === 高雄醫學院 === 醫學研究所 === 78 === Candida albicans KM302是一伺機性的致病酵母菌,可黏著並侵蝕頰內上皮細胞(Bu- ccal epithelial cclls,BEC) ,使細胞造成凹洞現象,當其培養至靜止期時,可從 上清液分離出細胞外聚合物(EP),此EP含有一具強抗原性的黏著素(Adhesin) 與其他 具抗原性的醣蛋白以及黏多醣。黏著素之分子量為48.7kd,是主要的細胞表面抗原(m...
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Published: |
1990
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ndltd-TW-078KMC025340072015-10-13T15:12:06Z http://ndltd.ncl.edu.tw/handle/73943585391611404281 Candida albicans細胞表面的超顯微構造抗原定位, 及抗原黏著素特性之研究 Candidaalbicans細胞表面的超顯微構造抗原定位,及抗原黏著素特性之研究 CHEN,JI-LAN 陳季蘭 碩士 高雄醫學院 醫學研究所 78 Candida albicans KM302是一伺機性的致病酵母菌,可黏著並侵蝕頰內上皮細胞(Bu- ccal epithelial cclls,BEC) ,使細胞造成凹洞現象,當其培養至靜止期時,可從 上清液分離出細胞外聚合物(EP),此EP含有一具強抗原性的黏著素(Adhesin) 與其他 具抗原性的醣蛋白以及黏多醣。黏著素之分子量為48.7kd,是主要的細胞表面抗原(m ajor cell surface antigen, mAg)。 以 Mono Q 陰離子交換快速層析法,GonA-Sepharose親和層析法,Sephadex G-100膠 過濾法,以及SDS-PAGE分離C.albicans胚芽分生孢子的EP與 (或) 水溶性細胞壁萃取 物 (CWE),均可部份或完全得到 mAg,此抗原可與C.albicans KM302的抗血清反應, 但不能與Saccharomyces cerevisial抗血清作用。另一酵母菌株Kluvcromyces frag- ilis之 CWE不含此特異性表面抗原。 月ConA-gold 複合物標記法可使Au顆粒標示在細胞表面的glucose 及mannosc 之聚合 物上。另以Immuno-gold 的複合物與兔子抗G.albicans血清來標示C.albicans的表面 抗原,可發現mAg 及其他表面抗原主要位於細胞表面與細胞壁中。 在兔疫螢光染色標記中,以KM302 的胚芽分生孢子吸附過之兔子抗ATCC32354 血清染 色ATCC32354 ,螢光只能標示出芽管與假菌絲,顯示其含有特異性抗原。同法以K.F- RAGILIS 和兔子抗KM302 血清作用,則染色在芽痕(bud scars) ,胎記(birth marks ) 及細胞與細胞之間,表示共通抗原介在這些部位。 從C.albicans KM302籍由SDS-PAGE分離出來分子量48.7kd的mAg 其pI為 6.1,含有95 .7%的蛋白質,4% 的醣類以及微量之磷與硫,此蛋白質含有485 個胺基酸(trypto- phan除外) ,其中有最多量的glycine (133個) 。從另一菌株SG5314分離出來之 mAg 亦含有與KM302 菌株同量的蛋白質,醣類以及硫與磷,此蛋白質含有473 個胺基酸, 其中亦含有多量之 glycine,顯示兩菌株之mAg 其胺基酸組成無重大的差異,而這兩 菌株分離出來之主要表面抗原均為黏著素(adhesin) ,可減低C.albicans對頰內上皮 細胞之黏著力約42%。 ZENG,HUI-MEI ZHANG,JUN-CHANG 曾慧美 張均昌 1990 學位論文 ; thesis 52 zh-TW |
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碩士 === 高雄醫學院 === 醫學研究所 === 78 === Candida albicans KM302是一伺機性的致病酵母菌,可黏著並侵蝕頰內上皮細胞(Bu-
ccal epithelial cclls,BEC) ,使細胞造成凹洞現象,當其培養至靜止期時,可從
上清液分離出細胞外聚合物(EP),此EP含有一具強抗原性的黏著素(Adhesin) 與其他
具抗原性的醣蛋白以及黏多醣。黏著素之分子量為48.7kd,是主要的細胞表面抗原(m
ajor cell surface antigen, mAg)。
以 Mono Q 陰離子交換快速層析法,GonA-Sepharose親和層析法,Sephadex G-100膠
過濾法,以及SDS-PAGE分離C.albicans胚芽分生孢子的EP與 (或) 水溶性細胞壁萃取
物 (CWE),均可部份或完全得到 mAg,此抗原可與C.albicans KM302的抗血清反應,
但不能與Saccharomyces cerevisial抗血清作用。另一酵母菌株Kluvcromyces frag-
ilis之 CWE不含此特異性表面抗原。
月ConA-gold 複合物標記法可使Au顆粒標示在細胞表面的glucose 及mannosc 之聚合
物上。另以Immuno-gold 的複合物與兔子抗G.albicans血清來標示C.albicans的表面
抗原,可發現mAg 及其他表面抗原主要位於細胞表面與細胞壁中。
在兔疫螢光染色標記中,以KM302 的胚芽分生孢子吸附過之兔子抗ATCC32354 血清染
色ATCC32354 ,螢光只能標示出芽管與假菌絲,顯示其含有特異性抗原。同法以K.F-
RAGILIS 和兔子抗KM302 血清作用,則染色在芽痕(bud scars) ,胎記(birth marks
) 及細胞與細胞之間,表示共通抗原介在這些部位。
從C.albicans KM302籍由SDS-PAGE分離出來分子量48.7kd的mAg 其pI為 6.1,含有95
.7%的蛋白質,4% 的醣類以及微量之磷與硫,此蛋白質含有485 個胺基酸(trypto-
phan除外) ,其中有最多量的glycine (133個) 。從另一菌株SG5314分離出來之 mAg
亦含有與KM302 菌株同量的蛋白質,醣類以及硫與磷,此蛋白質含有473 個胺基酸,
其中亦含有多量之 glycine,顯示兩菌株之mAg 其胺基酸組成無重大的差異,而這兩
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細胞之黏著力約42%。
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