The interaction of insulin and glucocorticoid in human hepatoma cell line

• Main Authors: JIANG,JI-WU, 蔣輯武
• Other Authors: ZHOU,CHENG-GONG
• Format: Others
• Language: zh-TW
• Published: 1990
• Online Access: http://ndltd.ncl.edu.tw/handle/93759212186325614125

碩士 === 國立陽明大學 === 生物學研究所 === 78 === Hep3B 是一個完全分化的人類肝癌細胞株，其細胞帶有特殊的胰島素受體及糖皮素受 體。因此，其提供了一個很好的模式以研究胰島素及糖皮素對肝癌細胞基因調控之間 的交互作用。 Hep3B 細胞染色體中有 B型肝炎病毒DNA 鑲嵌，可以持續分泌B 型肝炎病毒表面抗原 到培養液中，我們首先探討胰島素及糖皮素對表面抗原產生的調節作用。結果發現， 胰島素可以抑制，而糖皮素則可以增強表面抗原的產生, 但在兩種激素合併處理下, 胰島素則具有優勢的影響。同時，我們觀察表面抗原訊息核糖酸受到這兩種激素的調 節亦與表面抗原的產生類似。 但是當我們將細胞預先處理糖皮素後，再處理胰島素，結果發現胰島素不再抑制表面 抗原的產生，我們稱此現象為「糖皮素誘發胰島素抗性」 (Glucocorticoid-induced insulin resistance) 為了明膫胰島素抗性的機轉，我們首先測定糖皮素對胰島素受 體的影響。結果發現糖皮素處理後，細胞表面胰島素受體數目反而增加約100%，胰島 素與其受體結合的親合力(affinty) 則不變。在細胞外(invitro) 用胰島素刺激胰島 素受體自體磷酸化的反應 (autophosphorylation)。在糖皮素處理後亦有顯著增加。 同時我們用30S 標記的甲硫氨酸發現糖皮素可以增加，而胰島素本身則會抑制其受體 的合成，在這兩種激素合併處理下，胰島素的抑制作用仍扮演優勢的影響；此外，用 Northern吸溼雜化實驗顯示胰島素受體訊息核糖核酸所受到的調節情形與其蛋白質合 成的情形一致。 綜合以上的結果，糖皮素所導致的胰島素抗性的機轉應該不是在受體層次的調節，而 是作用在受體後層次(post-rcceptlevel)的訊號傳遞上，因此我們進一步探討胰島素 抗性產生後，胰島素對HBV RNA 的影響。結果發現預先處理糖皮素後，胰島素即不能 抑制HBV 表面抗原訊息核糖核酸的產生，顯示雖然糖皮素可以增加胰島素受體，但確 會干擾胰島素調控HBV RNA 的訊號傳遞，因此，本研究結果提供了一個好的模式在未 來去探討胰島素抗性的機制。