Role of P-glycoprotein in the Intestinal Absorption of Etoposide in Rats

• Main Authors: Bee-Lien Leu, 陸碧蓮
• Other Authors: Jin-ding Huang
• Format: Others
• Language: zh-TW
• Published: 1993
• Online Access: http://ndltd.ncl.edu.tw/handle/25560215636876652430

碩士 === 國立成功大學 === 藥理學研究所 === 81 === P-醣蛋白(P-glycoprotein;Pgp)以主動運輸的方式將許多化學治療劑例 如 etoposide 打出癌細胞，導致多重抗藥性(multidrug resistance)。 Pgp不僅存在癌細胞，也存在某些正常組織，例如小腸黏膜刷狀毛(brush border)細胞膜。Quinidine,臨床上是抗心律不整藥，過去證據顯示它能 克服多重抗藥性，其作用可能藉由干擾Pgp的功能。我們的假說認為藉由 quinidine抑制小腸Pgp的作用，可能會降低etoposide從血液釋出腸腔， 因而增加其血中濃度，等於增加etoposide的吸收。利用小腸everted sacs的方法可以研究etoposide之吸收。事先加入不同之抑制劑，一為Pgp 之單株抗體:C219(0.1U/ml)；另一為Pgp所需ATP水解之抑制劑:5'- adenylylimidodiphosphate(AMPPNP)(0.2 N)，可以發現etoposide的吸收 增加。相似地，加入quinidine(1mg/ml)，etoposide的吸收也有明顯增加 的情形。另外在動物實驗方面，利用麻醉老鼠腸腔之循環式灌流( intraluminal recirculated perfusion)，可以觀察 etoposide在體內的 吸收情形。同時給予etoposide及quinidine(1mg/ml或 2mg/ml)靜脈輸注 ，均可增加etoposide血中濃度，而且隨quinidine的濃度增加而增加0。 觀察etoposide在小腸的釋出，我們靜脈輸注etoposide (0.2 mg/hr)，其 小腸廓清率(Intestinal Clearance)為41.7±7.2 mg/hr/kg；當加入 quinidine 1mg/hr，結果發現etoposide小腸廓清率降低成為18.4±3.8 ml/hr/kg。由RT/PCR方法得知mdr gene products在正常老鼠小腸ileum端 存在量比較高。進一步，我們將一些MDR基因/P-醣蛋白的誘導劑，如 sodium arsenite (10 mg/kg)、sodium butyrate (0.5 mg/kg)及3- methylcholanthrene (170 μg/kg) 每天注射到老鼠體內，發現mdr基因 表現於ileum部位之誘導不明顯；而在jejunum部位的誘導顯著增加；另一 方面以Pgp專一性單株抗體作西方點墨法偵測Pgp表現，則不管ileum或 jejunum都有誘導增加。在everted sacs 實驗顯示Pgp受質 rhodamine 123 於jejunum部位的釋出明顯增加，在ileum 則無差異；而 Pgp另一受 質etoposide的吸收不論是ileum或jejunum均顯著增加。結論是 rhodamine 123 乃mdr1所encoded之Pgp專一性之受質，對etoposide顯然 為其它mdr gene encoded的Pgp isoezyme所媒介。綜合以上體外(in vitro)及半離體(in situ)的研究結果顯示，在老鼠小腸P-醣蛋白對於 etoposide吸收過程中扮演重要角色。