The study of conantokins by CD and NMR

• Main Authors: Chen,Chin-Shan, 陳金善
• Other Authors: Lyu,Ping-Chuang
• Format: Others
• Language: zh-TW
• Published: 1996
• Online Access: http://ndltd.ncl.edu.tw/handle/02254831366345133444

碩士 === 國立清華大學 === 生命科學研究所 === 84 === Conantokin-T和Conantokin-G(簡稱con-T及con-G)是分別從鬱金香芋螺及 地理芋螺分泌的毒液中萃取出來的peptides，屬於神經毒的一種．它們會 抑制N-甲基-D-天門冬胺酸受體(N-methyl-D-as- partate receptor，簡 稱NMDAR)的活性，使細胞對鈣離子的通透性降低．在老鼠的活體實驗中， 發現其症狀有昏睡或過份興奮兩種現象，其反應與老鼠的年齡相關，顯 示 NMDAR可能相當於一個神經發育的開關．　　Con-T及con-G 各有21 和17個胺基酸，它們沒有半胱胺酸(Cys)但含有豐富的gamma- carboxyglutamate (Gla)，由旋光光譜觀察到若將con-T中的Gla全換為 Glu (稱為con-ET)，將使結構的螺旋性由 73％降低至45％，可見Gla對 con-T的結構有一定的影響，另外由鈣離子及EDTA滴定實驗可知鈣離子對 con-T的結構影響甚小．　　根據濃度及溫度相關實驗，con-T 螺旋結構 的形成與分子間的作用無關，進一步地由pH及鹽類(氯化鈉)的滴定實驗， 驗證了分子內的正負電(鹽橋)具有穩定con-T螺旋結構的特性，另一方面 ，我們也由TOCSY，NOESY，及DQF-COSY光譜裡所得到的限制條件配合距離 幾何(distance geometry)，在insightII軟體下進行限制性的分子動態( restrained molecular dynamics)計算及能量最小化(ene- rgy minimization)，以解出適當的幾何結構，其解出的分子模型可輔助說明 con-T具有形成鹽橋的能力．