Imobilização de lipase com atividade de transesterificação produzida pelo novo isolado Acremonium-like rog 2.1.9 em matrizes a base de resíduos agroindustriais e aplicação na produção de biodiesel /

• Main Author: Brito, Rafaela Rodrigues de.
• Other Authors: Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas.
• Format: Others
• Language: Portuguese; Portuguese; Texto em português; resumos em português e inglês
• Published: São José do Rio Preto, 2016
• Subjects: Biotecnologia.; Enzimas imobilizadas.; Lipase.; Biodiesel.; Transesterificação.; Biocatálise.; Resíduos agrícolas.; Biotechnology
• Online Access: http://hdl.handle.net/11449/148890

Orientador: Eleni Gomes === Banca: Maricy Raquel Lindenbah Bonfá === Banca: Heizir Ferreira de Castro === Banca: Adriana Aguiar Mendes === Banca: Tatiane Lembo === Resumo: As lipases apresentam atividades catalíticas específicas as quais permitem seu uso em diferentes setores da indústria, como de alimentos, tratamento de águas residuais, cosméticos, farmacêuticos e biocombutíveis. A imobilização dessas enzimas torna mais eficiente sua aplicação uma vez que preserva suas propriedades bioquímicas nas condições reacionais e facilita recuperação e reutilização. O objetivo deste trabalho foi caracterizar a lipase bruta produzida pelo fungo Acremonium-like ROG 2.1.9, purificá-la parcialmente e imobilizá-la em diferentes matrizes, incluindo resíduos agro-industriais, e sua utilização na produção de biodiesel por transesterificação enzimática. A enzima apresentou maior atividade a pH 7,0 e a 45°C e estabilidade na presença de n-hexano e metanol, com 92% e 40% de atividade residual, respectivamente, após 24 horas em presença daqueles compostos. A lipase mostrou ainda, especificidade por ácidos graxos de cadeia média como p-nitrofenil decanoato (C10:0), seguido de p-nitrofenil palmitato (C16:0). A enzima foi purificada parcialmente por precipitação fracionada com sulfato de amônio, com maior rendimento obtido na faixa entre 30-50% de saturação do sal. Após ser parcialmente purificada, a lipase foi imobilizada por adsorção em bagaço de cana e sabugo de milho não ativados, por meio de interação hidrofóbica em Sepabeads C18, Lewatit 105 e Lewatit 1600, por interação iônica em PEI-agarose, MANAE-sabugo de milho e MANAE-bagaço de cana e por ligação covalente... === Abstract: Lipases have specific catalytic activities which allow its use in different industry sectors such as food, waste water treatment, cosmetics, pharmaceuticals and biofuel. The efficiency, preservation of the biochemical properties, recovery and reuse of the activity of theses enzymes are increased by immobilization on an inert support.The objective of this study was to purify partially and characterize the lipase transesterification produced by Acremonium-like ROG 2.1.9, and to immobilize it on different matrices, including agro industrial waste. The enzyme showed the highest activity at pH 7.0 and at 45 °C and stability in the presence of n-hexane and methanol (92% and 40%, respectively), for 24 hours. The lipase also showed specificity for meddium-chain fatty acids, as p-nitrophenyl decanoate (C10: 0), followed by p-nitrophenyl palmitate (C16: 0). The enzyme was partially purified by fractional precipitation with ammonium sulfate, with higher yield in the range of 30-50% salt saturation. The partially purified lipase was immobilized by adsorption on sugarcane bagasse and on corn cob, through hydrophobic interaction on Sepabeads C18, Lewatit 105 and Lewatit 1600; by ionic interaction on PEI-agarose, MANAE-corn cobs and MANAE- cane bagasse and by multipoint covalent bond on Glyoxyl-cob corn and Glyoxyl-cane bagasse. The immobilization by ionic interaction on MANAE-cob afforded an increase of 100% in the activity of enzyme. The Lip-MANAE-cob derivative showed higher ionic strength, LipMANAE-bagasse was more stable thermally (45 °C) and Lip-PEI-agarose derivative was the most stable in ethanol (30% v / v). The activity of the MANAE-cob and MANAE-bagasse derivatives increased in the presence of ethanol, n-hexane and DMSO and in the presence of surfactants CTAB and Triton X-100. Based on the results, it was conclude that the use of agro-industrial waste (bagasse and corn cob) ... === Mestre