Étude de voies de signalisation en rapport avec la maladie de Crohn

• Main Author: Mahfouz, Batoul
• Other Authors: Sorbonne Paris Cité
• Language: fr
• Published: 2016
• Subjects: IMA
• Online Access: http://www.theses.fr/2016USPCC273

La maladie de Crohn (MC) est une maladie inflammatoire chronique de l’intestin. Parmi les gènes associés à la MC, NOD2 est le plus fréquemment retrouvé chez les patients. Le premier but de ce travail était d’explorer le rôle de NOD2 dans la régulation des voies de signalisation et de déterminer l’impact des mutations associées à la MC et le syndrome de Blau (SB) sur ces voies. Nous avons étudié l’impact de deux mutations de NOD2, 1007fs et R334W, respectivement associées à la MC et au SB. La forme 1007fs est caractérisée par une perte de réponse au MDP ainsi qu’une augmentation exacerbée de la perméabilité paracellulaire (PP) en réponse à la carence nutritionnelle. Les cellules arborant la mutation R334W présentaient une activation basale de la voie p38 et NF-κB quasi inchangée par le MDP associée à une très faible sécrétion de cytokines pro-inflammatoires suggérant une perte de fonction de NOD2-R334W. La deuxième partie de cette thèse se focalise sur l’effet de l’imatinib (IMA), inhibiteur de tyrosine kinase, sur la PP, dans le but d’expliquer les effets bénéfiques observés chez les patients Crohn traités par l’IMA. Nous avons observé une réduction de l’augmentation de la PP induite par la carence nutritionnelle in vitro et ex vivo par l’IMA. Cet effet était spécifique à la PP induite par la carence et il ne semble pas associé à un effet inhibiteur de l’IMA sur le flux autophagique. Nous avons également montré une amélioration de la colite induite par le DSS des souris traitées avec l’IMA. Ces résultats expliquent en partie l’effet bénéfique de l’IMA observé chez les patients atteints de MC et encouragent à le proposer comme traitement pour cette maladie === Crohn's disease (CD) is an inflammatory bowel disease. Among the genes associated to CD, NOD2 is the most frequently mutated. It recognizes a component of the bacterial cell wall, muramyl dipeptide (MDP), and thus regulates several signaling pathways. The first aim of this study was to explore the role of NOD2 in the regulation of signaling pathways and to determine the impact of mutations associated with CD and Blau syndrome (BS) on these pathways. We studied the impact of two mutations in NOD2, 1007fs and R334W, respectively associated with CD and BS. We showed a loss of function of the 1007fs variant characterized by a loss of response to MDP for the activation of MAPK and NF-κB pathways and increased paracellular permeability (PP) in response to nutrient starvation (NS). Cells bearing the R334W mutation, exhibited a basal activation of p38 and NF-κB pathway unchanged by the MDP stimulation. This effect was correlated with a low secretion of proinflammatory cytokines by these cells also suggesting a loss of function of NOD2-R334W. The second part of this work focused on the effect of imatinib (IMA), a tyrosine kinase inhibitor, on the PP, in order to explain the beneficial effects observed in patients treated with IMA. We observed a reduction of the increase of the PP induced by NS in vitro and ex vivo by IMA. This effect was specific to PP induced by NS and was associated with an inhibitory role of IMA on the autophagic flux. We have also shown an improvement in the DSS induced-colitis in mice treated with IMA. These results partially explain the beneficial effect of IMA observed in CD patients and support it as a treatment for this disease