Μοριακή ανίχνευση παθογόνων βακτηρίων που ενέχονται στην περιοδοντίτιδα
Τα Gram αρνητικά βακτήρια είναι οι κύριοι αιτιολογικοί παράγοντες της περιοδοντικής νόσου, όπως τα βακτήρια Porphyromonas gingivalis, Actinοbacillus actinomycetemcomitans και Bacteroides forsythus. Σκοπός της εργασίας είναι η μοριακή ανίχνευση και ταυτοποίηση των βακτηρίων αυτών, σε δείγματα ασθεν...
Main Author: | |
---|---|
Other Authors: | |
Language: | gr |
Published: |
2010
|
Subjects: | |
Online Access: | http://nemertes.lis.upatras.gr/jspui/handle/10889/3683 |
id |
ndltd-upatras.gr-oai-nemertes-10889-3683 |
---|---|
record_format |
oai_dc |
spelling |
ndltd-upatras.gr-oai-nemertes-10889-36832015-10-30T05:03:33Z Μοριακή ανίχνευση παθογόνων βακτηρίων που ενέχονται στην περιοδοντίτιδα Πρωτόπαπα, Μαρία Αθανασιάδου, Αγλαϊα Χριστοφίδου, Μυρτώ Ζαρκάδης, Ιωάννης Αθανασιάδου, Αγλαΐα Περιοδοντίτιδα Παθογόνα βακτήρια Μοριακή ανίχνευση 617.632 Periodontitis Pathogenic bacterias Molecular identification Τα Gram αρνητικά βακτήρια είναι οι κύριοι αιτιολογικοί παράγοντες της περιοδοντικής νόσου, όπως τα βακτήρια Porphyromonas gingivalis, Actinοbacillus actinomycetemcomitans και Bacteroides forsythus. Σκοπός της εργασίας είναι η μοριακή ανίχνευση και ταυτοποίηση των βακτηρίων αυτών, σε δείγματα ασθενών με περιοδοντίτιδα, μέσω εντοπισμού ειδικών αλληλουχιών του DNA του γονότυπου κάθε παθογόνου. Τα δείγματα συλλέγονται σε PBS και DNA παρασκευάζεται με το QIAmp Tissue kit (Qiagen). Η μοριακή ανάλυση γίνεται με PCR και multiplex PCR, με ένα εκκινητή ειδικό για κάθε βακτήριο και ένα κοινό για τα τρία βακτήρια, για ειδική αλληλουχία του γονιδίου 16S rRNA.Το αποτέλεσμα της PCR ελέγχεται με ηλεκτροφόρηση αγαρόζης 2%.Η ταυτοποίηση του προϊόντος της PCR γίνεται με κατάτμηση του γενετικού υλικού με ειδικά ένζυμα περιορισμού. Ο προσδιορισμός της ευαισθησίας της μεθόδου γίνεται με συνεχείς αραιώσεις του DNA για κάθε βακτήριο και PCR.Εξετάστηκαν 42 δείγματα οδοντικής πλάκας. Τα εξεταζόμενα παθογόνα βακτήρια ανιχνεύτηκαν σε 40 δείγματα, εκ των οποίων: 15 περιέχουν τη Porphyromonas gingivalis, 6 τον Actinοbacillus actinomycetemcomitans και 19 το Bacteroides forsythus. Σε 5 δείγματα συνυπάρχουν τα βακτήρια Porphyromonas gingivalis και Bacteroides forsythus, ενώ σε 4 η Porphyromonas gingivalis και ο Actinοbacillus actinomycetemcomitans. Η μεθοδολογία αυτή παρουσιάζει υψηλή ειδικότητα καθότι δεν ανιχνεύεται μη ειδικό προϊόν PCR και υψηλή ευαισθησία, με το χαμηλότερο όριο ανίχνευσης για το Porphyromonas gingivalis είναι 280 pgr/αντίδραση και για το Actinοbacillus actinomycetemcomitans, 120 pgr/αντίδραση. Η υψηλή αποτελεσματικότητα, ειδικότητα και ευαισθησία μεθόδου, σε συνδυασμό με τον μικρό χρόνο ανάλυσης, καθιστούν τη μοριακή ανίχνευση και ταυτοποίηση των περιοδοντικά παθογόνων βακτηρίων αποτελεσματικότερη, σε σχέση με τις συμβατικές μεθόδους. Gram- bacteria are the main aetiological factors for periodontal disease(i.e.Porphyromonas gingivalis, Actinοbacillus actinomycetemcomitans και Bacteroides forsythus). The aim of this study is the molecular identification of these bacterias in samples of patients with periodontal disease. The molecular analysis is performed with PCR and multiplex PCR.42 samples with dental plague were evaluated. The pathogenic bacterias were found in 40 of these samples. The great efficacy, sensitivity and speciality of the method make the molecular identification of the periodontal pathogenic bacteria more useful than the conventional methods. 2010-09-20T05:16:31Z 2010-09-20T05:16:31Z 2010-06-04 2010-09-20T05:16:31Z Thesis http://nemertes.lis.upatras.gr/jspui/handle/10889/3683 gr Η ΒΚΠ διαθέτει αντίτυπο της διατριβής σε έντυπη μορφή στο βιβλιοστάσιο διδακτορικών διατριβών που βρίσκεται στο ισόγειο του κτιρίου της. 0 |
collection |
NDLTD |
language |
gr |
sources |
NDLTD |
topic |
Περιοδοντίτιδα Παθογόνα βακτήρια Μοριακή ανίχνευση 617.632 Periodontitis Pathogenic bacterias Molecular identification |
spellingShingle |
Περιοδοντίτιδα Παθογόνα βακτήρια Μοριακή ανίχνευση 617.632 Periodontitis Pathogenic bacterias Molecular identification Πρωτόπαπα, Μαρία Μοριακή ανίχνευση παθογόνων βακτηρίων που ενέχονται στην περιοδοντίτιδα |
description |
Τα Gram αρνητικά βακτήρια είναι οι κύριοι αιτιολογικοί παράγοντες της περιοδοντικής νόσου, όπως τα βακτήρια Porphyromonas gingivalis, Actinοbacillus actinomycetemcomitans και Bacteroides forsythus. Σκοπός της εργασίας είναι η μοριακή ανίχνευση και ταυτοποίηση των βακτηρίων αυτών, σε δείγματα ασθενών με περιοδοντίτιδα, μέσω εντοπισμού ειδικών αλληλουχιών του DNA του γονότυπου κάθε παθογόνου. Τα δείγματα συλλέγονται σε PBS και DNA παρασκευάζεται με το QIAmp Tissue kit (Qiagen). Η μοριακή ανάλυση γίνεται με PCR και multiplex PCR, με ένα εκκινητή ειδικό για κάθε βακτήριο και ένα κοινό για τα τρία βακτήρια, για ειδική αλληλουχία του γονιδίου 16S rRNA.Το αποτέλεσμα της PCR ελέγχεται με ηλεκτροφόρηση αγαρόζης 2%.Η ταυτοποίηση του προϊόντος της PCR γίνεται με κατάτμηση του γενετικού υλικού με ειδικά ένζυμα περιορισμού. Ο προσδιορισμός της ευαισθησίας της μεθόδου γίνεται με συνεχείς αραιώσεις του DNA για κάθε βακτήριο και PCR.Εξετάστηκαν 42 δείγματα οδοντικής πλάκας. Τα εξεταζόμενα παθογόνα βακτήρια ανιχνεύτηκαν σε 40 δείγματα, εκ των οποίων: 15 περιέχουν τη Porphyromonas gingivalis, 6 τον Actinοbacillus actinomycetemcomitans και 19 το Bacteroides forsythus. Σε 5 δείγματα συνυπάρχουν τα βακτήρια Porphyromonas gingivalis και Bacteroides forsythus, ενώ σε 4 η Porphyromonas gingivalis και ο Actinοbacillus actinomycetemcomitans. Η μεθοδολογία αυτή παρουσιάζει υψηλή ειδικότητα καθότι δεν ανιχνεύεται μη ειδικό προϊόν PCR και υψηλή ευαισθησία, με το χαμηλότερο όριο ανίχνευσης για το Porphyromonas gingivalis είναι 280 pgr/αντίδραση και για το Actinοbacillus actinomycetemcomitans, 120 pgr/αντίδραση.
Η υψηλή αποτελεσματικότητα, ειδικότητα και ευαισθησία μεθόδου, σε συνδυασμό με τον μικρό χρόνο ανάλυσης, καθιστούν τη μοριακή ανίχνευση και ταυτοποίηση των περιοδοντικά παθογόνων βακτηρίων αποτελεσματικότερη, σε σχέση με τις συμβατικές μεθόδους. === Gram- bacteria are the main aetiological factors for periodontal disease(i.e.Porphyromonas gingivalis, Actinοbacillus actinomycetemcomitans και Bacteroides forsythus). The aim of this study is the molecular identification of these bacterias in samples of patients with periodontal disease. The molecular analysis is performed with PCR and multiplex PCR.42 samples with dental plague were evaluated. The pathogenic bacterias were found in 40 of these samples. The great efficacy, sensitivity and speciality of the method make the molecular identification of the periodontal pathogenic bacteria more useful than the conventional methods. |
author2 |
Αθανασιάδου, Αγλαϊα |
author_facet |
Αθανασιάδου, Αγλαϊα Πρωτόπαπα, Μαρία |
author |
Πρωτόπαπα, Μαρία |
author_sort |
Πρωτόπαπα, Μαρία |
title |
Μοριακή ανίχνευση παθογόνων βακτηρίων που ενέχονται στην περιοδοντίτιδα |
title_short |
Μοριακή ανίχνευση παθογόνων βακτηρίων που ενέχονται στην περιοδοντίτιδα |
title_full |
Μοριακή ανίχνευση παθογόνων βακτηρίων που ενέχονται στην περιοδοντίτιδα |
title_fullStr |
Μοριακή ανίχνευση παθογόνων βακτηρίων που ενέχονται στην περιοδοντίτιδα |
title_full_unstemmed |
Μοριακή ανίχνευση παθογόνων βακτηρίων που ενέχονται στην περιοδοντίτιδα |
title_sort |
μοριακή ανίχνευση παθογόνων βακτηρίων που ενέχονται στην περιοδοντίτιδα |
publishDate |
2010 |
url |
http://nemertes.lis.upatras.gr/jspui/handle/10889/3683 |
work_keys_str_mv |
AT prōtopapamaria moriakēanichneusēpathogonōnbaktēriōnpouenechontaistēnperiodontitida |
_version_ |
1718118051516252160 |