| Summary: | L'étude structurelle des récepteurs couplés aux protéines G est essentielle pour la compréhension des mécanismes de reconnaissance entre l'hormone et son récepteur ainsi que des mécanismes d'activation de ces récepteurs. Dans cette étude, nous avons utilisé des approches biochimiques et la modélisation par homologie de séquence avec la rhodopsine bovine, pour cartographier les deux principaux récepteurs de l'AngII, AT[indice inférieur 1] et AT[indice inférieur 2]. Dans les approches biochimiques, nous avons principalement utilisé la méthode"Methionine Proximity Assay (MPA)" basée d'une part sur la préférence du benzophenone (BP) pour les résidus Met, et d'autre part sur le mécanisme réactionnel du clivage CNBr au niveau des résidus Met. Dans une partie de cette étude, nous avons déterminé que la distance maximale du rayon du champ d'action du BP envers les résidus Met se situait dans un intervalle de 5-7 êA, soit le double de la valeur trouvée dans la littérature (3.1 êA). La détermination de plusieurs points de contact sur ces deux récepteurs, nous a permis de dire que l'AngII adopte une conformation étirée à la fois dans AT[indice inférieur 1] et AT[indice inférieur 2] avec sa partie N-terminale proche des boucles extracellulaires et sa partie C-terminale plus en profondeur entre les DTM dans la pochette de liaison. Les modèles de liaison de l'AngII aux récepteurs AT[indice inférieur 1] ou AT[indice inférieur 2], corroborant les approches biochimiques représentent de très bons outils de visualisation pour analyser les résidus clés ou motifs structurels communs entre les différents membres de la classe A"rhodopsin-like" des RCPG. Nous avons remarqué notamment des homologies au niveau de la structure du récepteur hAT[indice inférieur 2] et de la rhodopsine. Dans ces deux récepteurs, la portion N-terminale et la 2ème boucle extracellulaire forment un feuillet [bêta] qui protège l'hormone une fois liée au récepteur de son environnement extérieur. Outre des similarités structurelles, la rhodopsine semble partager le même mécanisme d'activation que le récepteur AT[indice inférieur 1] impliquant des réseaux de ponts hydrogènes et des molécules d'eau permettant de stabiliser la transition d'une conformation à une autre et réduisant la barrière énergétique pour la rupture et la formation de liens hydrogènes.L'élucidation d'un mécanisme d'activation qui pourrait s'appliquer à différents membres de la classe A devient de plus en plus intéressant, étant donné la liste croissante de RCPG constitutivement actifs qui sont impliqués dans plusieurs pathologies. Connaître les éléments clés du mécanisme conduisant à la conformation active des RCPG, nous permettrait de développer de nouveaux agonistes inverses pour traiter ces pathologies.
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