High-Efficiency Knock-In of Large Reporter Genes in Human ESCs via CRISPR/Cas9-Induced Homology-Independent DNA Repair
CRISPR/Cas9系統在基因組DNA上誘導的定點雙鏈斷裂能夠通過同源介導機制或非同源性末端結合機制來修復。在各種人类細胞系中，包括具有多能乾性且受到廣泛關注的人的胚胎幹細胞及誘導性多能幹細胞，定點敲入外源DNA片段已有廣泛的研究；但是這些研究都集中在利用同源性介導的修復機制，因而敲入效率很低。 === 在本研究中，我們發現非同源性末端結合機制能夠高效地把CRISPR/Cas9系統誘導的定點斷裂的外源DNA片段連入到同样被誘導斷裂的內源基因組中，從而在各種細胞中实现外源DNA的高效敲入。通過這種不依賴于同源序列的DNA敲入技術，我們成功地將長达4.6kb的不含啟動子的ires-eGFP DN...
| Other Authors: | |
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| Format: | Others |
| Language: | English Chinese |
| Published: |
2016
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| Subjects: | |
| Online Access: | http://repository.lib.cuhk.edu.hk/en/item/cuhk-1292176 |